丹参对重症急性胰腺炎大鼠腹腔器官血流的影响

摘要

目的: 研究丹参对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠腹腔器官血流, 特别是胰腺血流的影响及其作用机制.

方法: 将大鼠随机分成丹参治疗组(SM)和重症急性胰腺炎组(SAP). 各组分别有数只大鼠于术后12、24 h处死, 观察血浆淀粉酶的变化. 另设正常对照组. 运用多普勒超声测定胰腺局部动脉(相当于胰头、体交界处)、门静脉血流、脾动脉及肠系膜上动脉血流.

结果: 丹参组12、24 h的血浆淀粉酶明显低于相同时点的SAP组(8091.2±1574.9 vs 15 142.8±2900.5, 8312.5±981.1 vs 16 987.1±1584.6, P<0.01). 丹参组和SAP组大鼠胰腺局部动脉, 门静脉、脾动脉及肠系膜上动脉中的血流在术后12 h时与对照组相比明显下降(P<0.01). 随胰腺炎的病程进展, 其24 h局部血流相比12 h时的下降更趋严重. 丹参组12、24 h大鼠胰腺局部动脉, 门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流量与SAP组相同时点相比明显增加(12 h: 0.49±0.04 vs 0.33±0.06, 0.60±0.04 vs 0.39±0.08, 0.53±0.04 vs 0.42±0.08; 0.57±0.08 vs 0.42±0.06; 24 h: 0.38±0.04 vs 0.29±0.04, 0.59±0.04 vs 0.41±0.01, 0.54±0.06 vs 0.32±0.02, 0.49±0.05 vs 0.38±0.04, P<0.01).

结论: 丹参能促使SAP大鼠胰腺血流量增加.

关键词: 急性胰腺炎; 丹参; 血流动力学; 大鼠; 多普勒超声

Effects of Salviae miltiorrhizae on the splanchnic blood flow in rats with severe acute pancreatitis

Ying-Ping Song, Cheng-Guo Wang, Jian-Guo Lu

Ying-Ping Song, Department of Anatomy, School of Basic Medicine, Zhangye Medical College, Zhangye 734000, Gansu Province, China

Cheng-Guo Wang, Jian-Guo Lu, Department of General Surgery, Tangdu Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, Shaanxi Province, China

Correspondence to: Dr. Ying-Ping Song, Department of Anatomy, School of Basic Medicine, Zhangye Medical College, 6 Xihuan Road, Zhangye 734000, Gansu Province, China. heatzl@sohu.com

Received: August 29, 2007
Revised: October 25, 2007
Accepted: October 28, 2007
Published online: December 8, 2007

Abstract

AIM: To observe the effects of Salviae mil-tiorrhizae (SM) on the splanchnic blood flow in rats with severe acute pancreatitis (SAP), and to elucidate the underlying mechanism.

METHODS: Thirty-two rats were randomly divided into SM group (n = 16) and SAP group (n = 16). Jejunotomy was performed in all. The SM group received indomethacin and the SAP group received saline. Another 8 normal rats were used as controls. At 12 and 24 hours after the induction of SAP, 8 rats in each group were sacrificed. Serum amylase was measured. The regional pancreatic blood flow was measured by Doppler ultrasound. The blood flow in the portal vein, spleen artery and superior mesenteric artery was also measured.

RESULTS: The levels of serum amylase at 12 and 24 hours after the induction of SAP were lower in the SM group than in the SAP group (8091.2 ± 1574.9 vs 15 142.8 ± 2900.5, 8312.5 ± 981.1 vs 16 987.1 ± 1584.6, P < 0.01). The regional pancreatic blood flow, and the blood flow in the portal vein, spleen artery and superiormesenteric artery were decreased significantly in the SAP and SM groups compared with the control group (P < 0.01), and continued to decrease after 24 hours. There were significant differences in blood flow levels in the portal vein, spleen artery and superiormesenteric artery between 12 and 24 hours. The blood flow levels in the regional pancreatic artery portal vein, spleen artery and superiormesenteric artery at 12 and 24 hours were also decreased in the SM group compared with the SAP group (12 hours: 0.49 ± 0.04 vs 0.33 ± 0.06, 0.60 ± 0.04 vs 0.39 ± 0.08, 0.53 ± 0.04 vs 0.42 ± 0.08; 0.57 ± 0.08 vs 0.42 ± 0.06; 24 hours: 0.38 ± 0.04 vs 0.29 ± 0.04, 0.59 ± 0.04 vs 0.41 ± 0.01, 0.54 ± 0.06 vs 0.32 ± 0.02, 0.49 ± 0.05 vs 0.38 ± 0.04, P < 0.01).

CONCLUSION: Enteral administration of SM might increase splanchnic blood flow in SAP rats.

Key Words: Severe acute pancreatitis; Salviae miltiorrhizae; Blood flow; Rat; Doppler ultrasound

0 引言

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP) 是一种并发症较多, 病死率很高的急腹症. 他发展迅速, 病理生理表现复杂多变[1-3]. 研究证实, 其病理过程突出地表现为以组织缺血为特征的胰腺血液循环障碍, 持续的局部组织的血液循环障碍可使胰腺水肿转化为坏死[4-7]. 而丹参(salviae miltiorrhizae, SM)对SAP大鼠胰腺血流影响的研究[8-11], 目前尚未见相关报道. 本实验通过应用丹参, 观察其对SAP大鼠胰腺血流的影响, 并探讨其作用机制, 为进一步探讨临床上应用该药治疗SAP的可能性提供了理论和实验依据.

1 材料和方法

1.1 材料

♂Sprague-Dawiey(SD)大鼠47只, 清洁级2级, 体质量200-280 g, 由第四军医大学实验动物中心提供. 适应性喂养24 h后用于实验. 丹参(北京大学药学院), 牛磺胆酸钠(Sigma公司), 淀粉酶试剂盒(Roche公司), Imexlab 9100多普勒超声诊断仪(美国Imex公司), 多普勒超声诊断仪专用的8 MHz探头(产品号X1-M008)(美国Imex公司).

1.2 方法

1.2.1 动物模型的制作: 大鼠术前禁食12 h, 盐酸氯胺酮(80 mg/kg)ip麻醉, 常规消毒, 上腹部正中切口进腹, 找到胰腺, 分离后用小号平针头于胰腺包膜下广泛多点注射40 g/L牛磺胆酸钠约1 mL(200 mg/kg). 于近端空肠造瘘, 置入空肠造瘘管, 隧道式包埋, 腹壁固定. 将其经皮下隧道由背部肩胛区引出体外, 以弹簧螺旋保护装置固定[12-13], 并保护导管, 置大鼠于代谢笼内. 大鼠可自由活动, 术后禁食, 但可饮水. 造模后的32只SAP大鼠采用随机数字表法分为丹参组(n = 16)和SAP组(n = 16). 各组又分为2个亚组, 分别于术后12, 24 h处死. 另设不进行任何手术操作的正常对照组(n = 8). 所有动物术后可自由饮水, 术后24 h进颗粒饮食. 丹参组大鼠术后3 h经空肠造瘘管给药, 剂量为10 mg/kg, 1次/6 h, 1-2次. 配制时, 药物溶于生理盐水中, 即刻使用. SAP组大鼠经空肠造瘘管给予等量的DMSO, 对照组动物仅作开腹手术.

1.2.2 血浆淀粉酶的测定: 取血3 mL, 4℃, 3500 r/min离心20 min, 取上清液, -70℃冰箱保存. 使用Reflotron仪器测定淀粉酶, 按试剂盒说明书, 结果以U/L表示.

1.2.3 胰腺局部动脉、门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉血流的测定: 大鼠麻醉下剖腹, 在相当于胰头、胰体交界处相对固定的位置找到与胰管平行之胰腺血管, 涂少量耦合剂, 以多普勒超声诊断仪专用的8 MHz探头正对血流方向, 与血管成30度-45度夹角, 探查胰腺血流, 记录波形并测量波幅. 同法分别于SAP术后12, 24 h测定胰腺局部动脉血流、门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流.

统计学处理 由本校统计教研室采用SPSS12.0统计软件分析完成. 所有数据以mean±SD表示, 行ANOVA方差分析, P<0.05为差异有显著性意义.

2 结果

实验共纳入47只动物, 对40只进行了结果分析, 并无脱落情况发生.

2.1 血浆淀粉酶测定结果

SAP组血浆淀粉酶在各时点与对照组相比均显著升高(P<0.01), 并随时间延长继续升高(P<0.05). 各实验组较对照组均显著升高(P<0.01). SAP组血浆淀粉酶明显高于丹参组, 各时点相比有极显著差异(P<0.01, 表1).

表1 各组大鼠血浆淀粉酶和胰腺、门静脉、脾动脉、肠系膜上动脉血流指标(mean±SD).

分组	n	血浆淀 粉酶(U/L)	胰腺局部动 脉血流(kHz)	肠系膜上动 脉血流(kHz)	门静脉 血流(kHz)	脾动脉 血流(kHz)
SAP组
12 h	8	15 142.8±2900.5b	0.33±0.06b	0.42±0.06b	0.39±0.08b	0.42±0.08b
24 h	8	16 987.1±1584.6bf	0.29±0.04b	0.38±0.04b	0.41±0.01b	0.32±0.02b
丹参组
12 h	8	8091.2±1574.9bd	0.49±0.04bd	0.57±0.08bd	0.60±0.04bd	0.53±0.04bd
24 h	8	8312.5±981.1bd	0.38±0.04bd	0.49±0.05bd	0.59±0.04bd	0.54±0.06bd
对照组	8	4021.7±467.8	0.64±0.03	0.68±0.07	0.66±0.03	0.71±0.08

^bP<0.01 vs 对照组;

^dP<0.01 vs SAP相应组;

^fP<0.01 vs SAP 12 h组.

2.2 胰腺局部动脉血流、门静脉血流、脾动脉血流及肠系膜上动脉血流测定结果

丹参组、SAP组各时点胰腺局部动脉、肠系膜上动脉、门静脉和脾动脉血流较对照组均明显下降(P<0.01). 丹参组各时点胰腺局部动脉、肠系膜上动脉、门静脉和脾动脉血流较相应时点SAP组均明显升高(P<0.01). 在丹参组, 随胰腺炎病程进展, 胰腺局部血流的下降更明显(P<0.05, 表1).

3 讨论

SAP的发病机制至今未能完全阐明. 以往研究认为除了胰腺内胰酶激活后引起自身消化外, 多项研究还发现SAP时胰腺血流和胰腺微循环灌注量减少, 胰腺微循环障碍可使轻症水肿型急性胰腺炎转化为SAP[1-5,14-17]. SAP时的微循环障碍又成为病情恶化的一个重要因素. 目前观察胰腺微循环常用的方法有: (1)红细胞标记后体内显微术: 该方法虽能直接观察微循环变化, 生动直观, 但技术设备的要求很高[18]. (2)多普勒超声测定: 是通过测定血管血流来间接反映微循环状况, 该方法简单、有效[19]. 我们通过Imexlab 9100多普勒超声诊断仪测定大鼠胰腺血管显示有良好的敏感性. 研究发现, SAP大鼠模型建立后12 h, 胰腺局部血流明显下降, 同时伴肠道、门静脉和脾动脉血流量明显下降, 提示在SAP早期就存在着内脏器官血流下降. 本实验发现SAP时24 h血流量明显低于12 h, 提示胰腺血液循环障碍是SAP发展过程中加剧胰腺损伤的一个重要因素. 对于SAP发展的不同阶段, 均有不同程度的胰腺缺血和组织灌注不足或微循环淤滞, 特别是红细胞的强烈聚集可加重病情[6,20].

丹参是我国具有代表性的活血化瘀中药, 具有扩张血管、改善血液循环的作用, 价格低廉、应用广泛. 据文献报道, 丹参有效成分丹参酮ⅡA、丹参素和丹酚酸, 经体内外试验证明均是有效的抗氧化剂, 尤其以丹酚酸的抗氧化作用最强[21-23]. 丹参水溶性成分能显著抑制动物的心、脑、肝、肾、睾丸的脂质过氧化[6-7]. 本研究结果显示, 丹参能在SAP时扩张内脏血管, 增加内脏血流量[6-7], 减轻胰腺的病理损害, 阻止病变的继续发展. 本实验应用丹参来治疗SAP, 是第一次系统的在微循环系统变化上了解丹参对SAP的影响, 还有进一步研究的必要.

评论

背景资料

目前对重症急性胰腺炎的发病机制和治疗研究很多, 但发病机制至今未能完全阐明, 本文利用丹参对该病的发病机制等进行初步的研究.

研发前沿

目前重症急性胰腺炎的发病机制是研究热点, 其机制非常复杂急需研究清楚. 而对SAP的治疗是重点, 但疗效好的药物尚未发现.

创新盘点

本文第一次使用检测腹腔血管的血流变化情况来观察丹参治疗SAP的疗效, 并取得较好的结果.

应用要点

本文的结果提示在以后临床治疗SAP时, 可采用丹参进行积极治疗.

同行评价

本文选题新颖, 语句通顺, 对研究急性胰腺炎有参考意义.

备注

编辑:何燕 电编:何基才

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