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世界华人消化杂志. 2006-03-28; 14(9): 923-926
在线出版日期: 2006-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i9.923
胰腺癌组织黏蛋白MUC1表达的意义
高志强, 丁志强, 陈勇军, 李晓云, 罗强, 陈忠
高志强, 丁志强, 陈勇军, 李晓云, 罗强, 陈忠, 华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科 湖北省武汉市 430030
通讯作者: 高志强, 430030, 华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科. gaozqyl@126.com
电话: 027-62415764
收稿日期: 2006-01-14
修回日期: 2006-02-01
接受日期: 2006-02-08
在线出版日期: 2006-03-28

目的: 探讨MUC1在胰腺癌组织中的表达及其在胰腺癌诊断和治疗中的意义.

方法: 采用免疫组化方法检测43例原发性胰腺癌组织和15例正常胰腺组织中MUC1的表达.

结果: MUC1在胰腺癌组织中的阳性表达率为67.4%, 明显高于正常胰腺组织(20.0%), 与正常胰腺组织之间存在统计学差异(χ2 = 8.293, P<0.01). MUC1在胰腺癌组织中阳性表达率与胰腺癌淋巴结转移及TNM分期存在关联(χ2 = 5.180, P = 0.023; χ2 = 4.289, P = 0.038).

结论: MUC1可作为胰腺癌患者预后评价指标, 并可用于诊断及作为免疫治疗的靶抗原.

关键词: 胰腺癌; 黏蛋白; MUC1; 免疫组化
引文著录: 高志强, 丁志强, 陈勇军, 李晓云, 罗强, 陈忠. 胰腺癌组织黏蛋白MUC1表达的意义. 世界华人消化杂志 2006; 14(9): 923-926
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: January 14, 2006
Revised: February 1, 2006
Accepted: February 8, 2006
Published online: March 28, 2006

N/A

Key Words: N/A
0 引言

胰腺癌(pancreatic cancer)是预后较差的恶性肿瘤之一, 其发病率有逐年上升趋势, 在西方国家已成为癌肿死亡的第5位[1]. 由于胰腺癌发病早期无明显临床症状, 恶性程度高, 较早发生局部浸润和远处转移, 使得胰腺癌患者临床治疗效果差[2]. 因此, 寻找胰腺癌的早期诊断和治疗的新途径具有重要的现实意义. 黏蛋白(MUC)是一类高度糖基化的高分子质量糖蛋白, 主要存在于体腔上皮细胞及其分泌的黏液中, 起保护和润滑功能, 参与了细胞间黏附、信息传导、作为细胞受体等多种功能. MUC1是MUC黏蛋白家族的成员, 属Ⅰ型跨膜蛋白[3], 在多种肿瘤过度表达, 但MUC1黏蛋白的表达与胰腺癌的临床病理特征的关系报道较少. 因此, 我们采用免疫组化的方法检测MUC1在胰腺癌中的表达及意义, 以检测MUC1在胰腺癌诊断和治疗中的意义.

1 材料和方法
1.1 材料

标本来源于华中科技大学同济医学院附属同济医院1997/2005手术切除的胰腺癌标本43例. 男29例, 女14例. 年龄20-79岁, 平均53岁. 高分化癌11例, 中分化癌24例, 低分化癌8例. 肿瘤位于胰头者29例, 位于胰体尾者14例. 正常对照组标本, 取自法医学系非胰腺疾病死亡人员尸检标本15例, 男9例, 女6例, 年龄16-67岁, 平均48岁. 胰腺标本经病理检查均无炎症、化生及增生性病变. MUC1mAb(克隆系Ma695)购自北京中杉生物制剂公司, SP试剂盒及DAB显色剂购自福州迈新生物技术公司.

1.2 方法

采用SP免疫组化技术, 石蜡切片脱蜡水化, 30 mL/L H2O2室温孵育10 min, 以消除内源性过氧化物酶活性, 蒸馏水洗, 以微波法进行抗原修复, PBS浸泡5 min, 100 mL/L山羊血清封闭液室温孵育10 min, 滴加一抗4 ℃过夜, 生物素标记的二抗及辣根酶标记链霉卵白素37 ℃各30 min, DAB显色, 水洗、苏木精复染、脱水, 光学显微镜下对染色结果进行评估. 非顶膜着色细胞占总细胞的百分数大于或等于10%为阳性, 小于10%为阴性表达. 仅在胰腺导管细胞顶膜表达为正常表达.

统计学处理 计数资料采用χ2检验, 所得数据运用SPSS 12.0软件系统进行处理, P<0.05为结果有统计学意义.

2 结果
2.1 MUC1在胰腺组织中的表达

胰腺癌组织43例中有29例MUC1呈阳性表达(阳性率67.4%), 可见棕黄色或深棕色颗粒. 阳性信号主要位于细胞质中(图1A). 在正常对照组15例中有12例为MUC1阴性表达(图1B), 只有3例呈弱阳性表达(阳性率20.0%). MUC1在胰腺癌中的阳性表达率和在正常胰腺组织中的阳性表达率差异有显著性(χ2 = 8.293, P = 0.004<0.01).

图1
图1 MUC1在胰腺组织中表达 (SP×200). A: 胰腺癌; B: 正常胰腺.
2.2 MUC1的表达与胰腺癌临床病理的关系

MUC1在胰腺癌中的表达随淋巴结转移的出现及肿瘤TNM分期的升高而明显增高, 存在显著统计学意义(P<0.05). 但与肿瘤位置及分化程度无明显相关. 说明MUC1表达随肿瘤病变进展逐渐增强(表1).

表1 胰腺癌组织中MUC1表达和临床病理特征的关系.
项目MUC1阳性表达
TNM分期Ⅰ-Ⅱ9/1850.0%
Ⅲ-Ⅳ20/25a80.0%
组织学分化高6/1154.5%
中18/2475.0%
低5/862.5%
肿瘤部位胰头20/2967.0%
胰体尾9/1464.3%
淋巴转移有转移19/2382.6%
无转移10/20a50.0%
aP<0.05.
3 讨论

胰腺癌起病隐匿, 早期无特异性症状和体征, 在诊断明确时多已属晚期, 治疗效果不佳, 预后极差[4]. 5 a生存率Ⅰ, Ⅱ期为30%, Ⅲ期和Ⅳ期分别只有7.9%和0%[5]. 目前在西方国家胰腺癌发病率及病死率仍然很高[6], 在我国的发病率亦有上升趋势[7]. 寻找对胰腺癌敏感和特异的诊断方法和有效的治疗方法已成为临床医务工作的重要组成部分. 黏蛋白(mucins, MUC)是广泛分布于机体正常各黏膜表面的高分子量的糖蛋白, 对正常的上皮起保护作用, 同时还介导信号传导和细胞黏附. 而在肿瘤组织中MUC多出现异常表达, 表现为量和质的改变并与肿瘤的浸润、转移及预后相关[8-10]. MUC1属于黏蛋白家族中的Ⅰ型跨膜蛋白, 由三部分组成, 即胞外段, 跨膜段和胞内段. 在正常腺上皮细胞, MUC1有较低表达. 主要分布于腺细胞表面, 呈顶端表达, 极性分布. 主要起物理屏障和维护环境的稳定、信号传导作用, 并可释放某些活性分子、参与细胞免疫[11-12]. MUC1在多种肿瘤组织中异常表达[13-18], 表现为量的增加和结构改变. 其畸形糖基化或糖基化不全, 使MUC1暴露出新的蛋白表位或新的糖抗原. 其同种型MUC1/Y具有肿瘤特异性. 因此, MUC1已作为一种肿瘤生物学标志物运用于乳腺癌、卵巢癌、胃肠肿瘤等的诊断和微小淋巴结转移检测. 胡晓宁 et al[19]将MUC1运用于乳腺癌前哨淋巴结阴性患者的检测, 在发现微小转移并指导治疗方面发挥了积极作用. 本结果提示MUC1在胰腺癌组织中过度表达, 且患者TNM分期越高, MUC1表达越高. Hinoda et al[20]也报道MUC1在胰腺癌中有过量表达, 且MUC1的表达与TNM分期、患者生存期有显著相关关系. 这说明MUC1在胰腺癌的侵袭和转移过程中发挥着重要的作用. 其发挥作用的可能作用机制为: (1)直接促进肿瘤的生长和加速其转移, 这可能与其抗黏附作用相关. Spicer et al[21]研究表明, MUC1功能缺陷鼠能显著降低致癌基因诱导的乳腺肿瘤的生长及减缓肿瘤转移的倾向. (2)通过分子间相互作用, 促进癌基因的表达和抑制抗癌基因的表达[22]. (3)高表达MUC1黏蛋白的肿瘤组织存在某种免疫逃逸机制, 包括MUC1分子对抗原抗体结合的空间位阻作用、中央型免疫耐受、肿瘤细胞抗原组成的改变、肿瘤细胞分泌的免疫抑制物的作用及诱导CTL凋亡[23].

胰腺癌的早期无特异性症状, 诊断十分困难. 影像学检查阳性结果需肿瘤发展到一定大小才会出现. 各项标志物检查的敏感性和特异性均不能达到单独运用于临床的要求. 往往需要多项指标的联合检查并结合临床及影像学资料才能得出较可靠的诊断. 在本研究中, MUC1黏蛋白在胰腺癌组织中的阳性率为67.4%, 与正常胰腺组织存在显著差异, 有望成为胰腺癌的一个鉴别诊断指标. 本研究同时表明, MUC1黏蛋白的表达与胰腺癌的TNM分期及胰腺周围淋巴结转移之间有着明显的正相关趋势. 胰腺癌的TNM分期及有无淋巴结转移是胰腺癌的两个重要的预后指标, 这已为很多研究所证实. 故MUC1黏蛋白的表达可作为患者预后的一个指标. MUC1具有抗原性, 在肿瘤中, 由于糖基化不全及异常糖基化, 肽表位暴露, 可诱导抗肿瘤的免疫应答, 使MUC1成为一种生物治疗的靶分子[24]. 最近, 对MUC1疫苗的研究已取得很大进展[25-26], 尤以治疗乳腺癌的研究较为深入[27-29]. 本研究证明, MUC1在胰腺癌, 特别是在有淋巴结转移的胰腺癌中高表达, 是一种能较好反映胰腺癌临床病理特征的生物学标志物, 可能成为胰腺癌靶向治疗的潜在靶点, 随着对MUC1与胰腺癌相关关系的逐步深入认识, 将针对MUC1的疫苗及其他治疗方式运用于胰腺癌的治疗存在着广阔前景, 有进一步研究开发的价值.

评论
背景资料

胰腺癌(carcinoma of pancreas)为发生在胰腺外分泌部分腺体的癌. 由于其早期症状不明显且位置隐蔽, 早期诊断困难, 发现时多已是晚期, 治疗效果极差. 寻求早期诊断方法和有效的治疗措施一直是医学工作者努力的目标. 肿瘤标志物检测及肿瘤生物学治疗在近年得到了广泛而深入的研究, 并带来了医学的进步. 肿瘤生物学治疗的基础是肿瘤相关抗原的存在. 随着多种与肿瘤的发生、发展密切相关的肿瘤抗原的发现并广泛应用于临床, 越来越多的肿瘤患者得到了更早的诊断, 治疗效果有了很大提高.

创新盘点

MUC1与多种肿瘤相关已有较多研究, 但MUC1与胰腺癌临床病理特征的研究较少. 本研究主要探讨了MUC1与胰腺癌的临床病理的关系, 有利于指导胰腺癌的诊断治疗.

名词解释

1 MUC黏蛋白是一族由多肽骨架和通过O-糖苷键与多肽骨架连接的糖基侧链组成的高糖基化、高分子量的糖蛋白, 其核心肽内含O-糖基化位点、富含苏氨酸和/或丝氨酸的一前一后的重复序列(TR)区域为特征. 到目前为止, 人类已经克隆出至少12个独特的MUC黏蛋白基因.

2 MUC1黏蛋白是一种Ⅰ型跨膜蛋白, 又称附膜蛋白, 分子量在240-450 ku, 其中O-连接的糖类占其80%. 在MUC中MUC1基因克隆最早, 他定位于染色体1q21-24. MUC1具有高度多态性, 由于不同等位基因TR数目的不同, 致使他在不同组织中出现不同的表达型.

同行评价

本研究起点不高. 但MUC1黏蛋白的表达与胰腺癌的临床病理特征的关系报道相对较少, 有一定意义.

电编:张敏 编辑:张海宁

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