电针四白穴对神经阻断大鼠胃肌电的影响

摘要

目的: 探讨电针四白穴, 对大鼠胃肌电兴奋途径.

方法: 大鼠32只, 随机分为4组. 选用ip抗胆碱能M受体阻断剂阿托品、交感神经节阻断剂六羟季胺和肾上腺素能神经阻断剂利血平, 观察电针四白穴对神经阻断大鼠胃肌电的影响.

结果: 大鼠腹腔注射阿托品、六羟季胺后, 慢波高活动相平均振幅、慢波高活动相时程/慢波周期比值以及快波平均峰簇数下降(P<0.01, P<0.05, P<0.01); 注射利血平后, 以上三种参数分别升高(P<0.01, P>0.05, P<0.01). 针刺四白穴能部分取消阿托品、六羟季胺对大鼠胃肌电的抑制效应(P<0.05或P>0.05).

结论: 电针足阳明经四白穴对胃调控作用的外周通路既有胆碱能神经、交感神经系统的参与, 又有肾上腺素能神经系统的参与.

关键词: 电针; 四白穴; 神经阻断; 胃肌电; 大鼠

Influences of electroacupuncture at Sibai point on gastric myoelectricity in rats with nerve blockage

Xiao-Rong Chang, Jie Yan, Yan-Lin Zhao, Jiang-Shan Li, Jian-Hua Liu, Jun-Feng He

Xiao-Rong Chang, Jie Yan, Yan-Lin Zhao, Jiang-Shan Li, Jian-Hua Liu, Jun-Feng He, Acupuncture and Massage College, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, Hunan Province, China

Supported by: the Basic Research Special Item on Traditional Chinese Medicine Theory in the National 973 Plan, No. 2005-CB523308.

Correspondence to: Acupuncture and Massage College, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, Hunan Province, China. xrchang1956@sina.com

Received: March 16, 2006
Revised: April 15, 2006
Accepted: May 8, 2006
Published online: June 28, 2006

Abstract

AIM: To explore the mechanism of electroacupuncture (EA) at Sibai point in the excitement of gastric myoelectricity.

METHODS: Thirty-two rats were randomly divided into group A, B, C and D. All the rats were electroacupunctured at Sibai Point. Meanwhile, the rats in group A, B, C and D were intraperitoneally injected with normal saline, atropine, hexamethonium and reserpine, respectively. The effects of EA at Sibai point on the gastric myoelectric activities in the rats were observed.

RESULTS: After intraperitoneal injection of atropine and hexamethonium, the average amplitude and ratio of period to time in the phase of high activity of gastric myoelectric slow wave, and the average numbers of the peaks of gastric myoelectric fast wave were significantly decreased (P < 0.01, P < 0.05, P < 0.01), while after intraperitoneal injection of reserpine, the above three parameters were increased (P < 0.01, P > 0.05, P < 0.01). EA at Sibai point partially relieved the inhibitory effect of atropine and hexamethonium on the gastric myoelectric activities in the rats (P < 0.05 or P > 0.05).

CONCLUSION: All the cholinergic, sympathetic and adrenergic nervous systems participate in the regulation and control of EA at Sibai point of Foot-Yangming meridian on gastrointestinal tract.

Key Words: Electroacupuncture; Sibai point; Nerve blockage; Gastric myoelectric activities; Rats

0 引言

我们以往的研究结果显示: 电针四白穴, 对大鼠胃肌电慢波高活动相平均振幅、慢波高活动相时程/慢波周期比值、快波平均峰簇数均有较明显的兴奋作用, 而电针非经穴对照点, 则无明显兴奋效应, 提示经脉-脏腑相关规律存在着相对特异性[1-4]. 那么, 产生这种针刺效应的作用途径是什么? 是我们本次研究的主要目的. 因此我们对32只大鼠, 选用ip抗胆碱能M受体阻断剂阿托品、交感神经节阻断剂六羟季胺和肾上腺素能神经阻断剂利血平, 观察电针四白穴对神经阻断大鼠胃肌电的影响, 进一步探讨产生上述效应的作用途径.

1 材料和方法

1.1 材料

健康SD大鼠32只, 雌雄不限, 体质量200-300 g, 随机分为4组, 每组8只. (1)电针四白加生理盐水组: 先予电针双侧四白穴30 min, 同步记录胃肌电60 min作为基线(对照值), 然后分别缓慢iP生理盐水2 mL, 再行电针四白穴30 min, 记录胃肌电60 min; (2)电针四白穴＋阿托品组; (3)电针四白穴＋六羟季胺(15 mg/kg)组; (4)电针四白穴+利血平(0.5 mg/kg)组. 以上(2)-(4)除ip药物分别为阿托品、六羟季胺、利血平外, 其余步骤均同电针四白穴加生理盐水组操作. 利血平组大鼠分别于记录前48 h和24 h ip利血平各1次. 穴位定位参照林文注《实验针灸学》[1] "动物针灸穴位图谱", 结合比较解剖学方法进行大鼠穴位定位. 电针刺激参数: 疏密波(疏波: 4 Hz; 密波: 50 Hz), 脉冲宽度0.5 ms, 输出电压2-4 V, 输出电流4-6 mA, 0-60峰幅(1 kW负载), 强度以毫针出现轻微颤动为度, 刺激时间30 min, 电针期间每隔10 min调整输出强度1次, 以维持适当的刺激强度.

1.2 方法

实验用大鼠禁食24 h(自由饮水)后称质量, 100 g/L乌拉坦5 mL/g ip麻醉后, 仰卧固定于鼠台, 无菌条件下沿腹正中线切开腹腔, 将直径2 mm铂金电极一枚置于胃窦部浆膜下, 距幽门括约肌0.5 cm, 另一枚置于胃体部, 距胃窦部电极约1 cm, 将导线通过皮下从两肩胛骨之间引出体外, 用一小塑料套管将其固定在颈部, 防止其被咬断而脱落, 同时注射青霉素防止感染, 饲养7 d后进行实验. 实验前24 h禁食, 自由饮水. 记录时用100 g/L乌拉坦(5 mL/g)ip麻醉, 将体内电极的两根体外导线分别连于二道生理记录仪的前置放大器, 同步记录胃肌电的快波和慢波. 快波记录参数: 时间常数0.02 s, 高频滤波30 Hz, 灵敏度1 mV/cm; 慢波记录参数: 时间常数2 s, 滤波10 Hz, 灵敏度5 mV/cm或2 mV/cm. 记录纸速10 mm/min. 慢波高活动相平均振幅(mV): 以慢波波形明显、规则、波幅最大的3 min为一区段, 共取4个区段, 计算各区段振幅的平均值. 慢波高活动相时程/慢波周期比值: 取3段节律明显慢波周期, 测量每一周期持续时间及高活动相出现时程, 并计算两者比值. 快波平均峰簇数: 以连续10 min内的所有快波为一区段, 测取3个区段, 计算各区段内峰簇数的平均值(次/min), 并计算处理前后快波平均峰簇数的差值. 大鼠在禁食24 h空腹状态下, 胃电慢波多呈正弦波, 呈周期性节律变化, 一般可分为高活动相和低活动相, 高活动相明显可见到持续时间较长的连续不规则的大峰簇, 在一次记录中呈周期对称的峰波, 波幅高耸, 呈双向不对称针型波, 单个或成簇状发放, 峰簇多发生于慢波平台上, 频率变化较为恒定; 低活动相波幅低平, 与高活动相交替出现.

统计学处理 实验数据以均数±标准差(mean±SD)表示, 组内自身前后比较采用配对t检验, 组间比较(方差齐)采用方差分析, 方差不齐则用秩和检验和q'检验, 全部数据用SPSS11.5软件进行处理.

2 结果

2.1 电针对慢波高活动相平均振幅的影响

组电针后(阻断前)组间比较, 慢波高活动相平均振幅无显著性差异(P>0.05). 禁食24 h空腹状态下大鼠腹注阿托品、六羟季胺后, 慢波高活动相平均振幅明显降低(表1), 较电针后(阻断前)有显著性差异(P<0.01), 与生理盐水组组间比较亦有显著性差异(P<0.01); 生理盐水组较处理前无显著性差异; 电针四白穴后(图1), 被抑制的慢波高活动相振幅有一定程度的恢复, 与阻断前比较有显著性差异(P<0.05); 阻断前后差值组间比较, 均无显著性差异. ip利血平后, 大鼠慢波高活动相平均振幅升高, 与电针后(阻断前)比较有显著性差异(P<0.05), 与生理盐水组组间比较亦有显著性差异(P<0.05); 针刺四白穴后(图1), 慢波高活动相振幅有一定程度的增强, 与电针后(阻断前)比较有显著性差异(P<0.05); 阻断前后差值组间比较, ip利血平组与生理盐水组组间比较有显著性差异(P<0.05).

表1 电针四白穴对大鼠慢波高活动相平均振幅的影响 (mean±SD，mV).

分组	电针后①	阻断剂②	阻断剂+电针③	②－①	③－①
+生理盐水	5.4±0.3	5.2±0.8	5.4±0.3	0.1±0.3	0.0±0.1
+阿托品	5.3±0.4	2.4±0.7b	5.2±0.5a	2.9±0.4d	0.1±0.1
+六羟季胺	5.3±0.5	2.7±0.7b	5.2±0.6a	2.6±0.4d	0.1±0.1
+利血平	5.3±0.6	5.6±0.5a	5.6±0.6a	0.6±0.2c	0.3±0.2c

^aP<0.05,

^bP<0.01 vs 电针后;

^cP<0.05,

^dP<0.01 vs 四白+生理盐水.

图1 电针"四白"穴前后大鼠胃肌电慢波和快波示意图. A: 电针前; B: 电针后.

2.2 针刺对慢波高活动相时程/慢波周期比值的影响

各组电针后(阻断前)组间比较(表2), 慢波高活动相时程/慢波周期比值无显著性差异(P>0.05). 禁食24 h空腹状态下大鼠ip阿托品、六羟季胺后, 慢波高活动相时程/慢波周期比值下降, 与电针后(阻断前)比较有显著性差异(P<0.05); 电针四白穴后慢波高活动相时程/慢波周期比值有一定程度的增加, 但与电针后(阻断前)比较均无显著性差异. 腹注利血平后, 大鼠慢波高活动相时程/慢波周期比值增加, 但与电针后(阻断前)比较无显著性差异. 针刺四白穴后慢波高活动相时程/慢波周期比值, 与电针后(阻断前)比较有统计学意义(P<0.05). 阻断前后差值组间比较, 均无统计学意义.

表2 针刺四白穴对大鼠慢波高活动相时程/慢波周期比值的影响 (mean±SD, mV).

分组	电针后①	阻断剂②	阻断剂+电针③	②－①	③－②
+生理盐水	0.5±0.0	0.5±0.1	0.5±0.0	0.0±0.0	0.0±0.0
+阿托品	0.5±0.1	0.5±0.0a	0.5±0.1	0.0±0.0	0.0±0.0
+六羟季胺	0.5±0.1	0.5±0.0a	0.5±0.1	0.0±0.0	0.0±0.0
+利血平	0.5±0.1	0.5±0.1	0.5±0.1a	0.0±0.0c	0.0±0.0

^aP<0.05 vs 电针后;

^cP<0.05 vs 四白+生理盐水.

2.3 针刺对快波平均峰簇数的影响

各组电针后(阻断前)组间比较, 快波平均峰簇数均无显著性差异. 禁食24 h空腹状态下大鼠腹注阿托品、六羟季胺后快波平均峰簇数下降(表3), 与电针后(阻断前)有显著性差异(P<0.01), 与生理盐水组组间比较也有显著性差异(P<0.05). 电针四白穴后(图1)快波峰簇发放有一定程度的增强, 但与电针后(阻断前)比较均无显著性差异. 阻断前后差值组间比较, 均无统计学意义.

表3 针刺四白穴对大鼠快波平均峰簇数的影响 (mean±SD，mV).

分组	电针后①	阻断剂②	阻断剂+电针③	②－①	③－②
+生理盐水	36.9±10.9	36.1±9.6	36.3±9.7	0.8±1.0	0.6±0.9
+阿托品	36.4±11.8	34.3±10.6b	36.1±11.3	2.1±1.0c	0.3±0.9
+六羟季胺	37.0±11.1	35.2±10.2b	36.7±11.1	1.8±0.9c	0.4±0.9
+利血平	37.3±9.7	38.2±10.1a	38.3±11.1a	0.9±0.9	1.0±0.9

^aP<0.05,

^bP<0.01 vs 电针后;

^cP<0.05 vs 四白+生理盐水.

3 讨论

根据祖国医学的经络理论和脏象学说关于"夫十二经脉者, 内属腑脏, 外络肢节", "经脉所过, 主治所及"的指导, 在针灸临床实践中, 多采用"循经取穴"的Ô则来选穴施治, 临床也证实不同经穴的针刺效果不一样, 这体现了体表穴位与所系脏腑的相关性, 以及经穴具有相关的特异性. 但是这种相关特异性的联系途径是什么? 是我们本次研究观察的主要目的. 我们用ip注射抗胆碱能M受体阻断剂阿托品、交感神经节阻断剂六羟季胺和肾上腺素能神经阻断剂利血平, 观察电针四白穴对神经阻断大鼠胃电的影响. 实验结果表明, 腹注阿托品及六羟季胺均可明显减弱电针四白穴对胃运动的增强效应, 从而表现为对大鼠胃电活动的抑制效应, 即慢波高活动相平均振幅、慢波高活动相时程/慢波周期比值、快波平均峰簇数发放明显下降, 说明胆碱能神经和交感神经均不同程度地参与了电针足阳明经穴对胃运动功能的调整作用; 针刺四白穴能部分拮抗阿托品、六羟季胺对大鼠胃电的抑制效应, 使被抑制的胃电活动得到一定程度的恢复, 表现为慢波高活动相平均振幅、慢波高活动相时程/慢波周期比值和快波平均峰簇数的发放均有一定程度的增强, 从而说明电针兴奋胃肌电的针刺效应, 既可能通过节后胆碱能途径, 又可能通过节前交感神经而起作用. 进一步的探讨发现, 电针四白穴引起胃电活动兴奋的针刺效应被明显减弱而不被上述神经阻断剂完全取消, 提示在副交感神经及交感神经中还可能含有抗神经阻断的非胆碱能等兴奋纤维. 也就是说, 在迷走胆碱能M受体、交感神经节被阻断后, 针刺对内脏的调整作用得以实现还存在着第3种成与介导, 肽能神经很可能参与这一效应. 电针四白穴可能通过激发肽能神经释放各种肽类物质, 促使被抑制的胃电得到部分恢复, 从而实现对胃肠道的调整作用. 现有研究资料已表明[5-6,8]: 针刺对胃肠运动的影响与肽类物质密切相关, 如电针足阳明经足三里、天枢、梁门可明显增强胃窦、十二指肠及近段空肠移行性复合运动(MMC), 并可使MTL, GAS, SP浓度增加, 针刺能部分取消M受体阻断剂如阿托品等对胃运动的抑制等[7,9-10], 本实验与此结论有一致性.

利血平是肾上腺素能神经阻断剂, 能够耗竭中枢及外周神经系统及其组织的儿茶酚胺和5羟色胺等递质[11-13], ip利血平后, 表现出胃运动的加强效应, 提示电针对胃电的调整作用同时受肾上腺素能神经的影响, 并有儿茶酚胺等神经递质的参与; 针刺效应的产生, 可能是由于去除肾上腺素能神抑制作用以后, 迷走神经等兴奋性神经活动占优势的缘故.

评论

背景资料

四白穴位于头面部, 隶属足阳明经. 《针灸学》教材中均提到了该穴主治"目赤肿痛、口眼喎斜"等局部病症, 但少见其治疗与之相关脏腑胃疾患的报导, 实验研究对四白穴与相关脏腑胃之间的联系以及作用的探讨亦较少. 本文课题组以往研究发现针刺足阳明经头面、躯干、下肢三个不同节段的穴位对胃功能活动均有着明显的调整和治疗作用, 其中以四白穴对胃功能的影响较为明显, 提示四白穴与所属经脉相关脏腑胃有着相对特异性的调控作用.

创新盘点

本文从经络(穴)-脏腑效应-效应机制等角度, 进一步探讨足阳明经与所属脏腑胃之间的相关性, 为"经脉(穴)-脏腑相关"研究提供新的理论与实验依据.

应用要点

本实验结果表明, 腹注阿托品及六羟季胺均可明显减弱电针四白穴对胃运动的增强效应，从而表现为对大鼠胃电活动的抑制效应，说明胆碱能神经和交感神经均不同程度地参与了电针足阳明经穴对胃运动功能的调整作用；针刺四白穴能部分拮抗阿托品、六羟季胺对大鼠胃电的抑制效应，使被抑制的胃电活动得到一定程度的恢复.

同行评价

本实验选用腹腔注射抗胆碱能M受体阻断剂阿托品、交感神经节阻断剂六羟季胺和肾上腺素能神经阻断剂利血平, 观察电针四白穴对神经阻断大鼠胃电的影响. 结果表明针刺四白穴能部分拮抗阿托品、六羟季胺对大鼠胃电的抑制效应, 使被抑制的胃电活动得到一定程度的恢复, 从而说明电针兴奋胃肌电的针刺效应, 既可能通过节后胆碱能途径, 又可能通过节前交感神经而起作用. 题目表达准确, 设计合理, 结论可信.

备注

电编:李琪 编辑:潘伯荣

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