临床研究 Open Access
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世界华人消化杂志. 2006-05-08; 14(13): 1294-1299
在线出版日期: 2006-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i13.1294
EBV相关胃癌ras基因突变及法尼基转移酶β-亚单位基因的表达
孙佰秀, 殷凡, 朱伟, 高玉, 孙淑红, 罗兵
孙佰秀, 青岛市妇女儿童医疗保健中心检验科 山东省青岛市 266011
殷凡, 朱伟, 高玉, 孙淑红, 罗兵, 青岛大学医学院微生物学教研室 山东省青岛市 266021
孙佰秀, 1995年青岛大学医学院本科毕业, 主管检验师, 主要从事临床检验工作.
通讯作者: 罗兵, 266021, 山东省青岛市登州路38号, 青岛大学医学院微生物教研室. qdluobing@yahoo.com
电话: 0532-83812423
收稿日期: 2006-02-06
修回日期: 2006-03-15
接受日期: 2006-03-20
在线出版日期: 2006-05-08

目的: 探讨EBV相关胃癌(EBVaGC)、EBV阴性胃癌(EBVnGC)及相应癌旁组织中ras基因突变和法尼基转移酶(FTase)的表达意义.

方法: 应用PCR-RFLP技术检测EBVaGCs13例、EBVnGCs45例以及相应癌旁组织58例中H-ras 12和K-ras 12, 13密码子点突变情况; RT-PCR技术检测FTase β亚单位mRNA的表达水平.

结果: 共检测到H-ras 12位点突变2例, 突变率为3.45%(2/58), 均发生在EBVnGCs, 未发现K-ras 12和13密码子点突变. 58例癌组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.93±0.39, 癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.78±0.26, 两者有显著性差异(t = 2.44, P = 0.02). EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.80±0.19, EBVnGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.96±0.43, 两者无显著性差异(t = 1.93, P = 0.06); EBVaGCs和癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t = 0.54, P = 0.60); EBVnGCs和癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平有显著性差异(t = 2.39, P = 0.02); 2例BHRF1阳性和11例BHRF1阴性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t = 0.26, P = 0.80); 6例BARF1阳性和7例BARF1阴性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平亦无显著性差异(t = 1.59, P = 0.14).

结论: 胃癌组织ras基因突变率较低, 胃癌组织中FTase β亚单位mRNA明显高于癌旁组织. EBVaGC组织中ras基因突变、FTase β亚单位表达与EBV感染无明显相关性.

关键词: 胃肿瘤; EB病毒; PCR-RFLP; RT-PCR; ras; FTase
引文著录: 孙佰秀, 殷凡, 朱伟, 高玉, 孙淑红, 罗兵. EBV相关胃癌ras基因突变及法尼基转移酶β-亚单位基因的表达. 世界华人消化杂志 2006; 14(13): 1294-1299
Ras mutation and expression of farnesyltransferase β mRNA in Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma
Bai-Xiu Sun, Fan Yin, Wei Zhu, Yu Gao, Shu-Hong Sun, Bing Luo
Bai-Xiu Sun, Clinical Laboratory, Qingdao Women & Children's Medical and Health Care Center, Qingdao 266011, Shandong Province, China
Fan Yin, Wei Zhu, Yu Gao, Shu-Hong Sun, Bing Luo, Department of Microbiology, Qingdao University Medical College, Qingdao 266021, Shandong Province, China
Correspondence to: Dr. Bing Luo, Department of Microbiology, Qingdao University Medical College, 38 Dengzhou Road, Qingdao 266021, Shandong Province, China. qdluobing@yahoo.com
Received: February 6, 2006
Revised: March 15, 2006
Accepted: March 20, 2006
Published online: May 8, 2006

AIM: To investigate ras gene mutations and farnesyltransferase (FTase) β mRNA expression in Epstein-Barr virus(EBV)-associated gastric carcinoma (EBVaGC), EBV-negative gastric carcinoma (EBVnGC) with matched clinico-pathological parameters and corresponding adjacent tissues of gastric carcinoma.

METHODS: The mutations of ras gene were detected by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) and the expression of FTase β mRNA was tested by reverse transcription PCR (RT-PCR) in 13 EBVaGCs, 45 EBVnGCs with matched clinicopathological parameters and 58 corresponding adjacent tissues of gastric carcinoma.

RESULTS: H-ras mutation at codon 12 was detected in 2(3.45%) cases of gastric carcinomas, both of which were EBVnGCs. No K-ras mutations occurred at codon 12 and 13 in all cases. The level of FTase β mRNA expression was 0.93 ± 0.39 in gastric carcinomas and 0.78 ± 0.26 in corresponding adjacent tissues, respectively. The difference between the two groups was significant (t = 2.44, P = 0.02). The level of FTase β mRNA expression was 0.80 ± 0.19 in EBVaGCs and 0.96 ± 0.43 in EBVnGCs respectively. The difference between the two groups was not significant (t = 1.93, P = 0.06). FTase β mRNA expression was not significantly different (t = 0.54, P = 0.60) between EBVaGCs and corresponding adjacent tissues either, while it was significant (t = 2.39, P = 0.02) between EBVnGCs and corresponding adjacent tissues. The level of FTase β mRNA expression had no significant relationship between 2 BHRF1 positive samples and 11 BHRF1 negetive samples of EBVaGCs (t = 0.26, P = 0.80) as well as between 6 BARF1 positive samples and 7 BARF1 negetive samples of EBVaGCs (t = 1.59, P = 0.14).

CONCLUSION: The frequency of ras gene mutations in gastric carcinomas is low in this study. The level of FTase β mRNA expression in gastric carcinomas is much higher than that in normal tissues. EBV infection has no significant correlations with ras mutations and FTase expression in EBVaGC.

Key Words: Stomach neoplasm; Epstein-Barr virus; PCR-RFLP; RT-PCR; ras; FTase
0 引言

Epstein-Barr病毒(EBV)是重要的DNA肿瘤病毒, 与人类多种淋巴系统恶性肿瘤如Burkitt淋巴瘤、移植后B淋巴细胞瘤、何杰金病及某些T淋巴细胞瘤等的发生密切相关. 近年来研究表明, 胃癌、肝癌和口腔癌组织中可检测到EBV基因组. 胃腺癌组织中也存在EBV阳性细胞, 同时伴有患者血清EBV抗体效价的升高, 证实EBV感染与胃癌存在一定的相关性[1-2]. 胃癌细胞内存在EBV者, 定义为EBV相关胃癌(EBV-associated gastric carcinoma, EBVaGC)[3]. 目前认为EBV相关肿瘤的发生、发展是病毒基因表达与癌基因、抑癌基因等异常协同作用, 导致正常细胞的生长调控发生障碍所致. EBVaGC组织中ras基因突变和FTase mRNA表达是否由于EBV参与而与EBV阴性胃癌(EBV-negative gastric carcinoma, EBVnGC)有所不同, 目前尚未见报道. 我们选择EBVaGC和各种临床指标与之匹配的EBVnGC作为研究对象, 应用PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测胃癌及相应癌旁组织中H-ras 12和K-ras 12, 13密码子点突变情况; 半定量RT-PCR检测FTase β亚单位mRNA的表达水平. 探讨EBVaGC中EBV基因表达与ras基因异常和FTase mRNA转录水平的关系, 为胃癌病因学研究和防治提供理论依据.

1 材料和方法
1.1 材料

2001-01/2002-12, 收集青岛大学医学院附属医院126例、青岛市市立医院25例和烟台毓璜顶医院34例胃癌患者手术切除的新鲜胃癌组织和相应癌旁组织(距离癌组织5 cm以上), 全部病例均经病理诊断证实.自上述185例胃癌患者中选取病理诊断与原位杂交证实的EBVaGCs 13例, 组织中均检测到EBV核抗原EBNA1基因的mRNA, EBNA2和潜伏膜蛋白LMP1基因mRNA均为阴性, 6例检测到EBV早期基因BARF1的表达, 2例检测到EBV早期基因BHRF1的表达[4] .临床病理资料与之匹配的EBVnGCs 45例, 平均年龄57.9±13.4(31-81)岁, 男48例, 女10例. EBV阳性组和EBV阴性组病例在年龄、性别、肿瘤部位、组织学类型、分化程度、有无淋巴结转移以及临床分期等方面均无显著性差异. 酚、氯仿、异戊醇法常规提取组织DNA, TRIzol一步法提取组织总RNA. cDNA的合成参照逆转录试剂盒要求的标准条件进行cDNA合成. 反应体系为: 10×Buffer 2 μL, MgCl2 5 mmol/L, dNTP 1 mmol/L, AMV反转录酶15 U, 核酸酶抑制剂0.5 U, Oligo(dT)15 0.5 μg, 模板RNA5 μL, 加Nuclease-Free Water至终体积20 μL. 42℃ 1 h, 99℃ 5 min, 然后快速冷却至4℃. 合成的cDNA用作PCR反应模板, -20℃保存备用.

1.2 方法

参照文献[5-6]设计并由上海生工生物工程技术服务有限公司合成检测ras基因突变的特异性引物, 同时选择相应的限制性核酸内切酶进行酶切分析, 引物序列、扩增产物大小以及所用限制性内切酶见表1. PCR反应体系为10×Buffer 2.5 μL, MgCl2 1.5 mmol/L, dNTP 0.2 mmol/L, 上下游引物各0.5 μmol/L, Taq DNA聚合酶1.0 U, DNA模板2 μL, 加双蒸水至终体积25 μL. 检测K-ras 12密码子突变的PCR扩增参数为95℃预变性5 min; 然后95℃ 40 s, 60℃ 30 s, 72℃ 30 s, 共35个循环; 最后72℃延伸5 min. 检测K-ras 13密码子突变的扩增参数中退火温度调整为50℃, 其余参数均与检测K-ras 12密码子突变的相同. 检测H-ras 12密码子突变的PCR扩增参数为94℃预变性5 min; 然后94℃ 30 s, 60℃ 30 s, 72℃ 30 s, 35个循环; 最后72℃延伸5 min. 取PCR扩增产物5 μL于含溴化乙锭(0.5 mg/L)的20 g/L琼脂糖凝胶中电泳, 80 V, 1 h, 紫外投射仪下观察结果, 与PCR marker DL2000进行对照分析, 若分别观察到162 bp, 159 bp和170 bp条带表明扩增成功.

表1 PCR-RFLP分析ras基因突变所用寡聚核苷酸引物和限制性核酸内切酶.
名称引物序列扩增产物酶突变型野生型
K-ras sense primer5'-ACTGAATATAAACTTGTGGTAGTTGGACCT-3'162 bpBstNⅠ162 bp133 bp+29 bp
12位点 antisense primer5'-CTGTATCAAAGAATGGTCCTGCACCAGTA-3'
K-ras sense primer5'-GTACTGGTGGAGTATTTGATAGTGTATTAA-3'159 bpHaeⅢ85 bp+74 bp85 bp+48 bp+26 bp
13位点 antisense primer5'-GTATCGTCAAGGCACTCTTGCCTAGG-3'
H-ras sense primer5'-CAGGGCCCTCCTTGGCAGG-3'170 bpHpaⅡ122 bp+48 bp66 bp+56 bp+48 bp
12位点 antisense primer5'-GTCGTATTCGTCCACAAAATGG-3'

1.2.1 限制性酶切反应: 检测K-ras 12位点突变的限制性酶切反应: BstNⅠ酶切PCR产物, 反应体系为10×NEB Buffer 2 μL, 100×BSA 0.2 μL, BstNⅠ5 U, PCR产物10 μL, 加双蒸水至20 μL, 混匀后60℃水浴过夜. 检测K-ras 13位点突变的限制性酶切反应: HaeⅢ酶切PCR产物, 反应体系为10×Buffer 2 μL, HaeⅢ 5 U, PCR产物5 μL, 加双蒸水至20 μL, 混匀后37℃水浴过夜. 检测 H-ras 12位点突变的限制性酶切反应: HpaⅡ酶切PCR产物, 反应体系为10×Buffer 2 μL, HpaⅡ 10 U, PCR产物5 μL, 加双蒸水至20 μL, 混匀后37℃水浴1 h.酶切产物于80 g/L聚丙烯酰胺凝胶中电泳, 溴化乙锭染色, 紫外投射仪下观察结果并拍照. 野生型和突变型条带结果判断标准见表1.

1.2.2 半定量RT-PCR检测FTase β亚单位mRNA表达: 法尼基转移酶β亚单位(FTase β subunit)和内参照基因GAPDH特异性引物参照文献[7,8]设计, 由上海生工生物技术服务公司合成. 引物序列如下: 目的基因sense primer: 5'-ATCCAGGCCACTACATACTTT-3'; antisense primer: 5'-GGCTGATAGATTTTTGGTTTG-3', 扩增产物片段长度为316 bp. 内参照基因sense primer: 5'-CTCAGACACCATGGGGAAGGTGA-3'; antisense primer: 5'-ATGATCTTGAGGCTGTTGTCATA-3', 扩增产物片段长度为450 bp. PCR反应体系为10×Buffer 2.5 μL, MgCl2 1.5 mmol/L, dNTPs 0.2 mmol/L, FTase β亚单位mRNA和内参照基因GAPDH上下游引物均0.3 μmol/L, Taq DNA聚合酶1.0 U, cDNA模板2 μL, 加双蒸水至终体积25 μL. PCR扩增参数为94℃预变性5 min; 94℃ 40 s, 56℃ 40 s, 72℃ 1 min, 35个循环; 最后72℃延伸10 min. 取PCR产物5 μL于含溴化乙锭(0.5mg/L)的20 g/L琼脂糖凝胶中电泳, 80 V, 1 h, 紫外投射仪下观察结果并拍照, 出现316 bp和450 bp扩增条带表明扩增成功. 用凝胶图像分析系统对FTase β亚单位mRNA的表达进行半定量分析, 以FTase β亚单位与GAPDH荧光强度乘面积的比值表示目的基因的表达水平, 大于或等于正常平均值+2SD者确定为过度表达.

统计学处理 应用SPSS10.0统计软件对实验数据进行处理. 采用t检验分析胃癌和癌旁组织FTase β亚单位mRNA表达的配对数据的差异; 多元逐步回归分析胃癌组织中FTase β亚单位mRNA表达水平与临床病理各参数, 前者为应变量, 后者为自变量, P<0.05认为有相关关系.

2 结果
2.1 ras基因突变

我们采用PCR-RFLP检测13例EBVaGCs, 45例EBVnGCs以及58例相应癌旁组织中K-ras 12和13密码子以及H-ras 12密码子点突变, 结果检测到2例H-ras 12位点突变, 突变率3.45%(2/58), 均发生在EBVnGCs. 未发现K-ras 12和13密码子点突变, 13例EBVaGCs以及58例相应癌旁组织中均未检测到上述密码子的点突变(图1).

图1
图1 胃癌组织K-ras和H-ras 12, 13密码子PCR-RFLP检测. A: K-ras 12. 1: Marker; 2: PCR产物; 3-8: PCR-RFLP产物. B: K-ras 13. 1: Marker; 2: PCR产物; 3-8: PCR-RFLP产物. C: H-ras 12. 1, 2, 5, 6: 野生型H-ras 12 PCR-RFLP产物; 3: 突变型H-ras 12 PCR-RFLP产物; 4: Marker.
2.2 EBVaGCs, EBVnGCs组织FTase β亚单位mRNA的表达

以GAPDH为内参照, 采用半定量RT-PCR技术检测13例EBVaGCs, 45例EBVnGCs以及58例相应癌旁组织FTase β亚单位mRNA表达, 上述组织中均检测到内参照基因GAPDH的表达, 表明cDNA分子完整以及PCR反应成功(图2). 58例胃癌组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.93±0.39, 癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.78±0.26, 统计学分析表明两者有显著性差异(t = 2.44, P = 0.02<0.05); 13例EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.80±0.19, 45例EBVnGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.96±0.43, 统计学分析表明两者无显著性差异(t = 1.93, P = 0.06); EBVaGCs和癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t = 0.54, P = 0.60); EBVnGCs和癌旁组织中FTase β亚单位mRNA表达水平有显著性差异(t = 2.39, P = 0.02<0.05). FTase β亚单位mRNA有3例过表达, 2例发生于EBVnGCs组织中, 1例发生于癌旁组织, 统计学分析过表达在胃癌以及癌旁组织间无显著性差异; FTase β亚单位mRNA过表达的病例中均无ras突变.

图2
图2 部分胃癌标本FTase β亚单位mRNA表达电泳结果. 1: Marker; 2-8: FTase β亚单位RT-PCR产物和GAPDH.
2.3 FTase β亚单位mRNA的相关性

2例BHRF1 阳性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.76±0.24, 11例BHRF1阴性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.86±0.21, 统计学分析表明两者无显著性差异(t = 0.26, P = 0.80); 6例BARF1阳性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.73±0.19, 7例BARF1阴性EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为0.90±0.21, 统计学分析表明两者无显著性差异(t = 1.59, P = 0.14). 以胃癌组织中FTase β亚单位mRNA表达水平为应变量, 临床病理各参数(包括性别、年龄、病理分型、组织学分级、有无淋巴结转移)为自变量, 进行多元逐步回归分析. 结果显示胃癌组织中FTase β亚单位mRNA表达水平增高与患者性别和病理分型有关, 与年龄、组织学分级无关, 发生在女性、病理分型为印戒细胞癌的胃癌组织FTase β亚单位mRNA表达水平有显著升高(表2).

表2 胃癌FTaseβ亚单位mRNA表达与临床病理参数的多元逐步回归分析.
临床病理B1标准误Beta2t值P值
性别0.4580.1780.3722.5660.014
年龄6.9330.0050.2021.3210.194
病理分型0.7650.3340.3362.2880.027
组织学分级7.9640.1530.0810.5200.606
淋巴结转移4.4400.1710.0400.2590.797
1非标准化回归分析;
2标准化回归分析.
3 讨论

ras基因作为癌基因家族的重要成员, 其基因突变以及编码蛋白过表达与许多肿瘤的发生、发展相关, ras基因家族包括H-ras, K-ras和N-ras, ras癌基因异常导致肿瘤发生的主要方式为点突变. 研究表明约10%-15%的肿瘤中至少有一种ras基因发生点突变, 点突变主要集中在第12, 13以及61位密码子; 胃癌组织中主要是H-ras和K-ras基因的突变. Yoo et al[9]采用PCR技术和DNA序列分析检测140例美国胃腺癌患者癌组织中ras基因突变情况, 结果显示ras基因点突变率为14%, H-ras 2位点突变5例; K-ras 13位点突变7例, 61位点突变3例; 未发现K-ras 12, H-ras 13及61位点突变. 郝莹 et al[10]应用多种方法检测胃癌演变过程中ras基因的突变, 发现肠化生、不典型增生以及胃癌组织中H-ras 12位点突变率分别为16.7%, 31.2%和34.7%, 各组间无显著性差异; 而浅表性胃炎及正常对照组未发现突变. 表明中国人胃癌组织中有一定的H-ras突变率; 而国外研究多显示胃癌组织中H-ras突变率较低甚至检测不到ras基因突变. 本研究结果显示H-ras 12位点突变发生率3.45%(2/58), 且均发生在EBVnGCs; 未发现K-ras 12, 13位点突变; 13例EBVaGCs以及58例相应癌旁组织中均未检测到ras基因突变. 这与Yoo et al的报道有所不同, 推测ras基因突变可能存在地区和种族差异.

ras基因编码产物ras蛋白的持续活性状态可引起细胞增生和转化, 细胞中ras蛋白需经过一系列修饰后才具有生物活性, ras蛋白脂化修饰中的法尼基化是其关键步骤[11-12]. ras蛋白的法尼基化主要由法尼基转移酶(FTase)催化完成, 未法尼基化的ras蛋白不能定位于细胞膜, 因而无法实现其信号传导功能和致癌作用. 目前ras蛋白作为抗肿瘤治疗的靶点, 已成为该领域研究的热点, 法尼基转移酶抑制剂已用于肺癌、头颈部癌和结肠癌等实体癌治疗的Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期临床试验[13-16]. FTase是由α, β两种亚单位组成的异二聚体, β-亚单位识别底物序列, 结合ras蛋白; α-亚单位是其底物法尼基二磷酸盐FPP的携带者, FTase的酶催化功能必须由α, β亚单位共同完成, 任何一个亚单位的变性都会影响酶活性. 为探讨FTase是否直接参与细胞增殖, Nagase et al[17]采用DNA重组技术将FTase α和β亚单位编码基因同时转染NIH3T3细胞, 对FTase过表达细胞中ras蛋白的法尼基化以及ras信号传导途径的上下游因子活性进行了研究.结果显示转染细胞呈FTase过表达, α, β亚单位蛋白表达较未转染细胞提高3-13倍, FTase活性提高1.5-3倍, 法尼基化ras蛋白表达增加, 且发现ras法尼基化提高程度低于法尼基酶活性升高程度. 进一步研究发现适量的生长因子如胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血小板衍生生长因子(PDGF)、纤维母细胞生长因子(bFGF)能明显提高FTase过表达细胞的DNA合成和细胞增殖, 若将FTase过表达NIH3T3接种裸鼠则可导致肿瘤形成, 但与ras过表达细胞注入裸鼠形成的肿瘤表型明显不同, 提示FTase直接参与细胞生长转化以及肿瘤形成机制. 本研究结果表明, 胃癌组织中FTase β亚单位mRNA明显高于癌旁组织, 但FTase的高表达与ras突变无相关性. 我们认为胃癌的发生发展是多种基因异常协同作用的结果, ras基因异常在该过程不起主要作用; FTase不是通过活化ras基因发挥其致瘤作用, 可能FTase直接参与细胞的癌变过程. FTase表达水平在EBVaGC及癌旁组织中无显著性差异, 该观点有待扩大标本量深入研究. FTase表达水平在女性和病理分型为印戒细胞癌[18]的胃癌组织中有显著升高, 但由于女性和印戒细胞癌标本例数较少, 目前该观点尚难定论.

我们曾对13例EBV相关胃癌组织中病毒潜伏期基因和早期基因的表达进行了研究[19-21], 结果显示, 13例EBVaGC组织中LMP1表达均缺失, 而6例BARF1阳性, 2例BHRF1阳性, 提示BARF1和 BHRF1可能代替LMP1在胃癌的发生发展过程中发挥重要作用. BARF1可在体外转化原代猴肾上皮细胞和人上皮细胞, 并使鼠成纤维细胞系BALB/c3T3或EBV阴性的B细胞系Louckes产生致瘤转化, 转化的鼠成纤维细胞接种至新生鼠体内, 可形成进行性表达BARF1的肿瘤[22-23]. Sall et al[24]研究认为BARF1具有生长因子作用. BHRF1与bcl-2的基因序列具有高度的同源性, 与bcl-2基因相似, BHRF1可抑制细胞凋亡, 促进细胞的生长和转化, 延长细胞寿命[25-26].本研究结果显示, EBVaGCs组织中FTase β亚单位mRNA表达水平与EBVnGCs中的表达水平无统计学意义, FTase表达与EBV编码基因的表达无明显相关性, 推测胃癌的发生是多因素作用的结果, 病毒感染和FTase高表达通过不同途径参与EBV相关胃癌的发生. 

评论
背景资料

近几年, 罗兵教授在EBV相关胃癌方面作了大量研究, 包括EBV相关基因、癌基因、抑癌基因在胃癌组织的表达及相关性, 发表多篇文章, 并获得山东省教育厅科技进步一等奖. 本文章旨在研究EBVaGC中EBV基因表达与ras基因异常和FTase mRNA转录水平的关系, 为胃癌病因学研究和防治提供理论依据, 尤其为法尼基转移酶抑制剂的临床应用提供理论依据. 本研究13例EBV相关胃癌标本选自185例病例, EBV相关胃癌发生率较低, 标本收集有一定难度, 需在以后作进一步工作.

同行评价

本研究通过cDNA的合成、PCR检测等方法探讨了EBVaGC、EBVnGC及癌旁组织基因突变中ras基因突变和FTase的表达. 得出胃癌ras基因突变率低、FTaseb亚单位mRNA明显高于癌旁组织. EBVaGC中ras基因突变、FTaseb亚单位表达与EBV感染无相关. 立题新颖, 设计合理, 方法先进, 数据可靠, 是一篇很好的学术论文.

电编:李琪 编辑:潘伯荣

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