胃癌细胞中P-糖蛋白和P53蛋白检测的意义

摘要

目的: 检测多药耐药基因产物P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)和P53蛋白在胃癌细胞中的表达及其临床意义．

方法: 采用免疫组化法, 对66例胃癌标本进行检测．

结果: 在未接受化疗胃癌患者的癌组织, P-gp和P53表达分别为34.5%和40.1%, P-gp表达与癌细胞分化程度有关(P<0.05), P53表达与淋巴结转移有关(P<0.01). P-gp和P53共同表达阳性者18例, 共同表达阴性者24例, 呈协同表达, 二者间有显著差异(P<0.05)．

结论: 对胃癌术后标本进行P-gp和P53蛋白检测, 揭示患者原发性耐药, 指导临床治疗方案的制定, 从而使化疗个体化．

关键词: 无

N/A

N/A

Correspondence to: N/A

Received: August 8, 2003
Revised: December 1, 2003
Accepted: December 8, 2003
Published online: April 15, 2005

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性直接影响化疗的疗效．如何克服耐药成功地进行肿瘤化疗, 是提高生存率的有效手段. 因此, 探讨耐药基因机制有着重要的实际意义及价值．

1 材料和方法

1.1 材料

收集我院胃癌的切除标本66例(术前未经化疗的胃癌组织)．

1.2 方法

标本经中性甲醛固定后, 石蜡包埋, 切片厚度为4 μm．P-gp, P53蛋白(鼠抗人抗体, 福州迈新生物技术开发公司), 采用S-P免疫组化法．P-gp阳性定位于胞膜及胞质, 呈棕黄色, 阳性细胞表达<10%为阴性．(数100个细胞其阳性细胞数少于10个者为阴性)P53蛋白阳性定位于细胞核, 呈棕黄色, 阳性细胞数<5%为阴性．

统计学处理 采用χ²检验．

2 结果

P-gp在胃癌中阳性表达为34.5%(23/66), 其阳性表达与胃癌浸润及淋巴结转移无关(P>0.05), 与胃癌分化程度有关(P<0.05, 表1), P53阳性表达为40.1%(27/66), 其表达与癌细胞浸润无关(P>0.05), 与淋巴结转移有明显差异(P<0.01, 表1). 在双重染色中P-gp和P53表达共同为阳性者为18例, 共同为阴性者为24例, 说明二者有一致性(P<0.05, 表2)．

表1 P-gp和P53蛋白在胃癌中表达.

P-gp	n	分化程度			P53	n	淋巴结转移		P	P53	浸润深度			P
		高	中	低			有	无			黏膜层	肌层	浆膜层
+	23	3a	6	14	+	27	23	4	<0.01	+	1	2	24	>0.05
-	43	25	12b	6	-	39	14	25		-	1	6	32

^aP<0.05,

^bP<0.01.

表2 P-gp和P53在胃癌细胞中的表达关系.

P-gp	P53+	P53-	(n)P
+	18	15
-	9	24	<0.05

3 讨论

多药抗药性(MDR)形成机制复杂, 其中途径之一是: 通过P-糖蛋白的过度表达．P-糖蛋白位于细胞膜, 是一种能量依赖性药物排除泵(energy-dependent drug efflux pump), 他既可与一些抗肿瘤药物结合, 又有与ATP结合位点, P-糖蛋白一旦与抗肿瘤药物结合, 就可通过ATP分解提供能量, 将瘤细胞内药物泵出胞外, 使肿瘤药物在胞内的浓度不断下降, 其细胞毒作用因而减弱甚至完全消失, 从而产生耐药, 导致化疗失败．因此, 如果能准确地检测MDR, P-gp表达水平, 用于指导临床治疗方案的选定, 将会有效地促进肿瘤消退、抑制复发与转移, 延长患者无瘤存活期和生存率．有研究表明胃癌细胞P-gp高表达患者其化疗效果差, 恶性度高, 比P-gp蛋白阴性的胃癌患者生存期短, 预后差[1-2] P-gp的阳性表达率各家报道不一, 有报道高达85%, 本研究P-gp蛋白阳性表达率为34.5%, 可能与用不同克隆的P-gp抗体和病例数量有关[5]．本研究P-gp蛋白阳性表达率为34.5%, 其阳性表达与癌细胞的浸润及转移无关(P<0.01), 故认为P-gp阳性表达有可能作为胃癌患者预后判断的一个独立指标, 但尚有待于进一步证实．关于胃癌与浸润、转移及分化程度的关系有报道与三者均无关[3]．

P53蛋白基因包括野生型及突变型两种, 其中突变型P53具有抑制癌细胞凋亡和促进癌细胞增殖的作用．本研究P53蛋白阳性表达为40.1%其与肿瘤细胞浸润、分化程度无关, 但与淋巴结转移有明显关系(P<0.01), 与文献报道相符, 提示P53过表达促进癌细胞增殖及癌细胞转移, 故对判断患者预后有一定临床意义．P-gp与P53蛋白表达呈正相关, 说明二者之间有协同表达作用, 有研究表明, 突变型 P53蛋白能增加MDR基因表达[3], 同时通过抗细胞凋亡机制使肿瘤细胞产生耐药．故认为P53蛋白高表达可为判断胃癌较差的一个指标[4-5]．

备注

编辑: 张海宁 电编: 潘伯荣

参考文献

1.	陈 春燕, 朱 兆华. 胃癌P-糖蛋白表达与化疗效果相关. 世界华人消化杂志. 2003;11:36-38.  [PubMed]  [DOI]

2.	Chen GK, Lacayo NJ, Duran GE, Wang Y, Bangs CD, Rea S, Kovacs M, Cherry AM, Brown JM, Sikic BI. Preferential expression of a mutant allele of the amplified MDR1(ABCB1)gene in drug-resistant variants of a human sarcoma. Br J Cancer. 2002;86:1578-1585.  [PubMed]  [DOI]

3.	李 建党, 施 作霖, 黄 良祥. 胃肠道腺癌P-糖蛋白和P53 蛋白表达的关系. 中华普通外科杂志. 2000;15:85-87.  [PubMed]  [DOI]

4.	赵 行远, 夏 传生, 吴 建平, 侯 炜, 刘 运芳. MDRI产物P-gp在结肠肿瘤中表达的意义. 世界华人消化杂志. 1999;7:991.  [PubMed]  [DOI]

5.	Ni CR. Expression significance of GST-p, P-gp, Top-II and nm23H1 in gastric carcinoma. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi. 2001;9:897-901.  [PubMed]  [DOI]