肝动脉自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化30例

摘要

目的: 探讨肝动脉插管自体骨髓干细胞移植的可行性及其对肝硬化患者肝功的改善作用.

方法: 肝硬化失代偿期患者30例, 分离其自体骨髓干细胞, 行肝动脉插管自体干细胞移植治疗.患者于移植后1、2、4、8 wk和12 wk进行肝功能等检测, 并观察其移植后临床症状的改善情况及术后的不良反应.

结果: 移植1, 4, 8 wk和12 wk后, 22例(73.3%)患者ALT逐渐降低, 由平均180.35±15.6 U/L降至70.36 ±21.3 U/L; 21例(70%)患者TBIL逐渐下降, 由平均155.32±23.1 μmol/L降至80.19±18.4 μmol/L; 23例(76.6%)患者ALB逐渐升高, 由平均26.36 ±16.3 g/L升至32.64±12.8 g/L.移植后全部(100%)患者PTA不同程度升高, 由治疗前平均26.18±13.9%上升至治疗12 wk后的51.63±22.7%.移植后大多数患者临床症状有明显改善: 移植后12 wk内腹水减轻的14例(46%); 食欲改善的22例(73%); 乏力好转18例(60%); 腹胀减轻13例(43%); 在30例移植患者中未发现严重不良反应及并发症.

结论: 自体骨髓干细胞移植作为治疗肝硬化的一种新的措施安全有效.

关键词: N/A

N/A

N/A

Correspondence to: N/A

Received: May 8, 2005
Revised: May 20, 2005
Accepted: May 30, 2005
Published online: July 15, 2005

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

对于各种终末期肝病, 原位肝移植是最理想的治疗选择, 但是供体的紧缺、移植后的免疫排斥反应以及高额的治疗费用限制了该种治疗方法的临床应用, 故迫切需要建立一种简便、安全并有效的治疗方法.骨髓干细胞移植是肝功能衰竭治疗的一个新的研究方向.本研究采用肝动脉导管自体骨髓干细胞移植进行失代偿期肝硬化治疗, 旨在探讨该治疗方法的疗效、可行性、安全性和实用性.

1 材料和方法

1.1 材料

2004-10/2005-02我科住院患者30例, 临床诊断为肝硬化失代偿期(Child C级), 其中女11例, 男19例, 26-65岁, 平均年龄47.3岁.诊断均2000年病毒性肝炎防治方案诊断标准[1].

1.2 方法

1.2.1 术前准备: 所有患者均于术前1 d行碘过敏实验, 双侧腹股沟备皮, 术前4 h禁食水.

1.2.2 自体骨髓干细胞分离制备: 患者行局部麻醉消毒, 在无菌条件下, 以18号骨髓穿刺针从髂后上棘进行穿刺, 抽取骨髓50-100 mL, 以4000 U肝素抗凝, 避免污染.参考Kai Wollert的方法[2], 患者骨髓离心去除脂肪层, 用等量DMEM培养液稀释骨髓, 制成细胞悬液.将骨髓轻轻加到密度1.073 g/mL的Percoll分离液上, 1200 r/min离心25 min(室温下).吸取界面细胞层, 用生理盐水洗脱, 1 500 r/min离心5 min, 共3次, 生理盐水重悬细胞, 镜下计数所用细胞为1.0×10¹¹/L, 置于37℃二氧化碳孵箱待用.

1.2.3 肝动脉导管干细胞移植: X光透视下, 经股动脉插管至肝固有动脉, 注射造影剂, 观察肝内血管情况及有无占位病变后, 将分离好的骨髓干细胞悬液注入肝内.穿刺点加压包扎.术后24 h插管侧髋关节呈伸直位并制动, 预防性应用抗生素3 d.行肝动脉导管治疗后常规护理.

1.2.4 术后观察: 术后1、4、8 wk及12 wk分别复查谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIl)、白蛋白(ALB)、凝血酶原活动度(PTA)等.并注意观察患者乏力、纳差、腹胀等症状的改善情况及不良反应发生情况.

2 结果

2.1 手术成功率

30例患者手术全部成功, 手术成功率为100%.

2.2 临床检验结果

移植1, 4, 8 wk和12 wk后, 22例(73.3%)患者ALT逐渐降低, 由平均180.35±15.6 U/L降至70.36±21.3 U/L; 21例(70%)患者TBIL逐渐下降, 由平均155.32±23.1 μmol/L降至80.19±18.4 μmol/L; 23例(76.6%)患者ALB逐渐升高, 由平均26.36±16.3 g/L升至32.64±12.8 g/L.移植后全部(100%)患者PTA不同程度升高, 由治疗前平均26.18±13.9%上升至治疗12 wk后的51.63±22.7%.

2.3 临床症状

移植后大多数患者临床症状有明显改善: 移植后12 wk内腹水减轻的14例(46%); 食欲改善的22例(73%); 乏力好转18例(60%); 腹胀减轻13例(43%).

2.4 不良反应

30例移植患者中未发现严重不良反应及并发症.术后轻度恶心1例, 发热1例.未见明显WBC下降、肝区疼痛、出血等并发症.

3 讨论

干细胞是指一类具有自我更新和分化能力的细胞[3-5], 干细胞的增殖及定向分化具有巨大的应用潜能, 已成为细胞生物学以及整个生命科学的研究热点.

干细胞定向分化为功能细胞并且应用于器官损伤的治疗, 一直是人类医学的梦想及追求目标, 研究表明, 在肝损伤及肝细胞再生的过程中[6-7], 干细胞起着重要的作用, 而骨髓干细胞是肝细胞的重要的肝外来源[8-9].骨髓干细胞在特定环境下可分化成肝干细胞及肝细胞, 从而参与肝功能的修复和重构[10-11].为探索骨髓干细胞对人类肝损伤的治疗作用, 我们在大量研究的基础上, 首次将骨髓干细胞应用于肝病治疗.本研究采用患者自体骨髓干细胞作为供体, 在体外分离纯化后移植患者体内, 观察骨髓干细胞移植能否使损伤的肝功能得以改善和恢复.

我们对30例肝硬化失代偿期的患者顺利进行了自体骨髓干细胞移植治疗.观察发现, 在移植12 wk后, 22例(73.3%)患者ALT逐渐降低, 21例(70%)患者TBIL逐渐下降, 23例(76.6%)患者ALB逐渐升高, 移植后全部(100%)患者PTA不同程度升高, 表明, 骨髓干细胞移植治疗后, 患者肝脏功能明显改善.我们还观察了自体骨髓干细胞移植后患者临床症状的变化, 发现移植后大多数患者有明显的改善.在30例移植患者中未发现严重不良反应及并发症.

重症肝病的治疗一直以来并没有令人满意的进展, 临床上主要仍以保肝对症及预防并发症为主.尤其是终末期肝病的治疗总体效果不甚理想.近年来原位肝移植已成为终末期肝病最理想的治疗选择, 但是供体的紧缺、移植后的免疫排斥反应以及高额的治疗费用限制了其临床应用.骨髓干细胞移植作为肝功能衰竭治疗的一个新的研究方向[12-13], 已经引起广泛关注, 并具有巨大的应用前景[14-15].

本研究中, 我们初步探讨了自体骨髓干细胞移植对失代偿期肝硬化患者肝功改善的作用, 结果令人满意.以上30例患者治疗后情况似乎提示: 自体骨髓干细胞移植治疗对肝硬化患者肝功改善、治疗时间缩短等有明显效果.然而, 自体骨髓干细胞在人受体肝脏内定植、生长分化及肝脏病理学改变情况还有待进一步研究.我们首次应用患者自体骨髓干细胞作为供体, 对肝硬化患者进行治疗, 探索干细胞在严重肝病患者的临床应用.这将为肝病治疗探索崭新的途径, 为干细胞治疗的进一步研究打下基础.

备注

编辑:王谨晖 审读:张海宁

参考文献

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