胃癌及癌前病变中PCNA、p53表达及其与H. pylori感染的关系

摘要

目的: 探讨胃癌及癌前病变胃上皮细胞的增殖与幽门螺杆菌(H. pylori)感染的关系及H. pylori感染致癌的可能机制.

方法: 应用快速尿素酶试验与W-S银染色法将各种病变分为H. pylori感染阳性组和阴性组, 应用免疫组化SP法对各种病变胃上皮细胞增殖相关基因蛋白PCNA、p53的表达进行检测.

结果: PCNA、p53表达随病变进展逐渐增加, 慢性浅表性胃炎组明显低于肠化生、不典型增生、胃癌组.且在浅表胃炎、肠化生组H. pylori阳性者PCNA表达明显高于H. pylori阴性者(68.7% vs 28.5%, 93.8% vs 52%, P<0.05).

结论: H. pylori感染可能通过促进PCNA、p53基因蛋白的过度表达而促进细胞增殖和恶性转化, 且这种影响主要发生在胃黏膜癌变的早期阶段.

关键词: N/A

N/A

N/A

Correspondence to: N/A

Received: February 14, 2005
Revised: February 25, 2005
Accepted: March 3, 2005
Published online: May 15, 2005

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

细胞增殖增加被认为是肿瘤发生的早期生物学改变之一[1-3].幽门螺杆菌(H. pylori)感染与胃癌的关系密切[4-5].因此研究胃黏膜上皮细胞增殖与H. pylori感染的关系具有重要的理论意义.我们通过检测增殖相关基因蛋白PCNA、p53在胃癌发生过程中的变化, 探讨胃癌及癌前病变胃上皮细胞动力学改变及H. pylori感染致癌的可能机制.

1 材料和方法

1.1 材料

选择2001-04/2002-10因上消化道症状来我院经胃镜检查诊断并经病理组织学检查证实为慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis, CSG)、肠化生(intestinal metaplasia, IM)、不典型增生(dysplasia, Dys)和胃癌(gastric cancer, GC)患者, 共172例, 其中H. pylori阳性者119例, H. pylori阴性者53例.除外2 wk内服用非甾体消炎药, 抗生素和铋剂化合物的病例.各组总例数、年龄及性别构成(表1).

表1 各组患者年龄、性别构成.

组别	n	平均年龄(岁)	年龄范围(岁)	男女比例(M/F)
CSG	30	50.6±5.1	21-79	17/13
IM	90	58.5±2.5	50-85	59/31
Dys	30	54.6±5.0	25-86	23/7
GC	22	62.1±5.1	30-83	12/10

1.2 方法

1.2.1 H. pylori感染检测采用快速尿素酶试验及Warthin-Starry银染色法, 二者均阳性为H. pylori(+).

1.2.2 PCNA及p53的检测采用免疫组化染色方法SP法, PCNA、p53单抗、SP试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司, 具体实验步骤按照试剂盒中所述进行.PCNA、 p53阳性反应细胞核为棕黄色颗粒.阳性细胞数量大于或等于50%为阳性表达.

统计学处理 采用χ²检验, P<0.05为有统计学意义.

2 结果

2.1 PCNA、p53在胃黏膜病变过程中的表达(表2)

表2 PCNA、p53在胃黏膜病变过程中的表达.

组织学类型	n	PCNA阳性例数(%)	p53阳性例数(%)
CSG	30	16(53.3)	1(3.3)
IM	90	68(75.6)a	22(24.4)b
Dys	30	28(93.3)ac	11(36.7)b
GC	22	19(86.4)a	18(81.8)bd

^aP<0.05 vs CSG组;

^bP<0.01 vs CSG组;

^cP<0.05 vs IM组;

^dP<0.01 vs IM, Dys组.

PCNA表达从CSG到IM逐渐增加, Dys时达高峰, CSG组明显低于IM、Dys、GC组(均P<0.05), Dys组明显高于IM组(P<0.05), 但与GC组无差异.p53表达从CSG、IM到Dys逐渐增加, GC时达高峰, CSG组明显低于IM组及Dys组(P<0.01), GC组明显高于IM组及Dys组(P<0.01).

2.2 H. pylori感染与胃黏膜病变过程中PCNA、p53的表达(表3)

表3 H. pylori感染与胃黏膜病变过程中PCNA、p53的表达.

组织学类型	n		H. pylori阳性率(%)	PCNA		p53
	H. pylori (+)	H. pylori (-)		H. pylori (+)	H. pylori (-)	H. pylori (+)	H. pylori (-)
CSG	16	14	53.3	11	4a	1	0
IM	65	25	72.2	61	13a	21	3
Dys	24	6	80.0	17	4	12	2
GC	14	8	63.6	12	5	11	6
Total	119	53	69.2	101	26a	55	11a

^aP<0.05 vs 组内H. pylori (+).

从总体上看H. pylori阳性组PCNA、p53的表达高于H. pylori阴性组(P<0.05).在CSG、IM组, H. pylori阳性患者的PCNA的表达明显高于H. pylori阴性患者(P<0.05), 而p53表达H. pylori阳性患者与H. pylori阴性患者无明显差异.

3 讨论

有实验表明, H. pylori感染可引起胃上皮细胞的过度增殖, 胃上皮细胞的过度增殖是胃癌发生中早期异常改变之一[6-7].因此H. pylori感染所致的胃上皮细胞增殖动力学的变化可能是胃癌发生与演变的重要细胞学基础.

PCNA是一种分子质量为36 ku的核蛋白, 是反映细胞增殖活性的最好生物学指标之一[8].我们的实验结果表明, PCNA表达由CSG至IM逐渐增加, 到Dys时达高峰, 与GC无差别, 提示从CSG、IM、Dys向GC演变过程中胃黏膜上皮细胞的增殖程度逐渐增加, 与以往结果相符[9].细胞的过度增殖可增加内外源性DNA受损的机会, 从而增加胃癌发生的危险性, 这为H. pylori在胃癌发病中的作用提供了一定的线索.在同一病变类型中, CSG组、IM组H. pylori阳性者胃上皮细胞增殖程度均高于H. pylori阴性者, 而在Dys和 GC组H. pylori阳性者和H. pylori阴性者胃上皮细胞增殖程度未见明显差异.这进一步提示H. pylori感染对胃上皮细胞增殖的影响主要在胃癌发生的早期阶段起作用[10-11], 因而我们强调及时清除H. pylori, 特别是在Dys发生之前清除H. pylori, 可能通过纠正胃上皮细胞增殖动力学异常而降低胃癌的发生率.

p53基因分为野生型和突变型, 野生型p53基因具有抑制细胞生长的功能, 而突变型p53则会刺激和促进细胞的生长[12].野生型p53蛋白半衰期短, 突变型p53蛋白半衰期延长, 并能稳定在较高水平上, 故用免疫组化方法检测到的p53蛋白代表了突变型p53蛋白的表达[13].既往研究表明, p53基因的突变和过表达不仅存在于胃癌各临床分期, 且可发生于癌变前各阶段[14].但也有研究显示, p53基因变异主要发生在胃癌晚期阶段[15].本实验显示从CSG、IM到Dys, p53蛋白表达逐渐增强, GC时达高峰; CSG组p53表达明显低于IM及Dys组, 而GC时p53表达明显高于IM和Dys组.提示p53蛋白过度表达不但与胃癌发生有关, 而且与癌前病变的发生亦有关, p53基因变异的出现有促进细胞恶性转化的作用, 与文献[16]报道相符.本实验还显示, 总体上, H. pylori阳性组 p53的表达高于H. pylori阴性组, 提示H. pylori感染的胃黏膜处于一种高增殖状态, H. pylori感染与p53过表达有关, H. pylori感染可能具有使野生型p53转变为突变型p53的作用, 使p53基因丧失抑癌活性, 因而有促进恶性转化的功能, 这也可能是H. pylori参与的致癌机制之一.但在同一类型病变中H. pylori阳性组p53表达的阳性率虽均高于H. pylori阴性组, 但二者比较差异不明显, 与文献[17]报道不甚一致.这可能与各组例数太少有关, 有待于进一步研究.

H. pylori感染可通过促进PCNA、p53基因蛋白的过度表达而引起细胞增殖增加, 且这种促进增殖的作用主要发生在胃黏膜病变的早期阶段.早期、及时根除H. pylori感染对降低胃癌发生的危险性有重要的临床和社会意义.

备注

编辑: 张海宁

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