结直肠癌患者血清p53抗体检测的意义

摘要

目的: 通过对结直肠癌患者血清p53抗体的检测, 分析其与临床病理特征的关系, 探讨其作为一种新的肿瘤标志物的临床意义.

方法: 选择2002-04/2003-01手术治疗的结直肠腺癌患者132例和同期非肿瘤患者36例为研究对象. 用ELISA法定性检测血清p53抗体.

结果: 结直肠癌组中53例(40.2%)血清p53抗体阳性, 而对照组仅1例(2.9%)阳性. 血清p53抗体与患者的性别, 年龄, 肿瘤位置及大小无关, 其阳性率在高分化腺癌为17%, 中分化腺癌为42%, 低分化腺癌为64% (P = 0.0007). 肝脏转移患者的血清p53抗体阳性率显著高于无肝转移患者(75% vs 37%, P = 0.0098). 发生淋巴结转移的患者, 血清p53抗体阳性率为52%, 而没有淋巴结转移患者的阳性率为33%(P = 0.0261). 在不同的Dukes分期中, 血清p53抗体的阳性率分别为A期14%, B期30%, C期44%, D期78%(P = 0.0013).

结论: 血清p53抗体可以反映结直肠癌的恶性生物学行为, 有助于临床判定病情, 监测疗效.

关键词: N/A

N/A

N/A

Correspondence to: N/A

Received: March 11, 2004
Revised: April 1, 2004
Accepted: April 5, 2004
Published online: July 15, 2004

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

结直肠癌发生P53基因突变者60-70%, 而且突变频率与肿瘤的恶性生物学行为相关. 血清p53抗体与p53基因突变显著相关, 从而开辟了检测p53基因突变的新途径[1-3]. 而且血清学检测p53抗体这一方法还具有取材方便, 性质稳定, 操作简便的优点, 更受到众多学者的瞩目. 我们通过对结直肠癌患者血清p53抗体的定性检测, 分析其与临床病理特征的关系, 探讨其作为一种新的肿瘤标志物的临床意义.

1 材料和方法

1.1 材料

2002-04/2003-01手术治疗结直肠腺癌患者132例和同期非肿瘤患者36例. 结直肠癌组平均年龄64.8(32-87)岁, 男74例, 女58例. 右半结肠癌43例, 左半结肠癌33例, 直肠癌56例. 所有病例术前未采取化疗和/或放疗, 术后经病理组织学检查证实诊断. 其中高分化腺癌35例, 中分化腺癌69例, 低分化腺癌28例. Dukes A期7例, B期64例, C期43例, D期18例. 对照组平均年龄65.3(33-75)岁, 男19例, 女17例. 急性阑尾炎9例, 腹股沟疝11例, 腹部闭和伤7例, 单纯性下肢静脉曲张3例, 混合痔6例.

1.2方法

术前1 h采取外周静脉血10 mL, 室温静置30 min, 4 ℃下1 500 r/min离心10 min, 取上清放置-80 ℃冰箱保存备用. 血清p53抗体ELISA试剂盒为德国Dianova公司生产(购于Cosmobio公司), 严格按照说明书的要求操作. p53抗体效价指数(titre index)大于10%为阳性.

统计学处理 计量指标用t检验, 计数指标用mean±SD 检验. 所有统计分析用Statview version 5.0.1 (SAS institute Inc 产品) 统计软件处理, P<0.05为差异有显著性.

2 结果

2.1 血清p53抗体阳性率

在132例结直肠癌患者中53例(40.2%)血清p53抗体呈阳性, 而对照组仅1例(2.9%)阳性, 两组间有显著的差异(P<0.0 001).

2.2 p53抗体与结直肠癌临床病理特征

血清p53抗体的出现与结直肠癌患者的年龄, 性别及肿瘤的大小、位置、大体形态无关, 而与肿瘤的分化程度, 有无肝脏转移或淋巴结转移及Dukes分期有关(表1). 血清p53抗体的阳性率在高分化腺癌为17%, 中分化腺癌为42%, 低分化腺癌为64%(P = 0.0007). 在发生肝脏转移的患者, 血清p53抗体的阳性率为75%, 而没有肝脏转移的患者中阳性率为37%, 统计学显示有显著差异(P = 0.0 098). 在淋巴结转移的患者, 血清p53抗体的阳性率为52%, 而在没有淋巴结转移的患者中阳性率为33%(P = 0.0 261). 在不同的Dukes分期中, 血清p53抗体的阳性率分别为A期14%, B期30%, C期44%, D期78%, 差异有显著性(P = 0.0 013).

表1 结直肠癌血清p53抗体与临床病理特征.

	p53抗体阴性(n = 79, 59.8%)	p53抗体阳性(n = 53, 40.2%)	阳性率
年龄 (岁)	64.3±10.3	65.5±9.2
男	42	32	43%
女	37	21	36%
肿瘤大小 (mm)	43.4±10.4	44.3±11.8
肿块型	14	11	44%
溃疡型	48	23	32%
浸润型	17	19	53%
右半结肠	27	16	37%
左半结肠	20	13	39%
直肠	32	24	43%
高分化腺癌	29	6	17%
中分化腺癌	40	29	42%b
低分化腺癌	10	18	64%
肝脏转移 阴性	76	44	37%
肝脏转移 阳性	3	9	75%b
淋巴结转移 阴性	54	26	33%
淋巴结转移 阳性	25	27	52%a
Dukes A期	6	1	14%
B期	45	19	30%
C期	24	19	44%b
D期	4	14	78%

^aP<0.05,

^bP<0.01.

3 讨论

血清p53抗体是突变型p53蛋白激发人体免疫系统产生的免疫反应产物. 由于p53基因错义突变而产生的突变型p53蛋白半衰期明显延长, 导致其在细胞内蓄积, 机体对这一非正常蛋白的免疫耐受丧失, 而产生p53抗体. 此外, 人们发现血清p53抗体的产生还依赖于突变型p53蛋白与热休克蛋白70家族成员(HSP70)的结合. P53/HSP70复合物可作为靶抗原激发机体的自身免疫应答, 产生p53抗体. p53抗体多数属于IgG, 少数属于IgM. 而且理化性质非常稳定, 在-80 ℃长期保存, 对抗体活性几乎无影响. 这一良好的特性使其便于临床应用. 血清p53抗体的阳性率在结直肠癌患者中为23-68%[4-7], 在健康人群为1-4%[5,7-8]. 我们研究显示血清p53抗体在结直肠癌中的阳性率为40.2%, 在对照组的非肿瘤患者中为2.9%. 这一结果充分说明血清p53抗体和结直肠癌有显著的相关性, 可以作为诊断的辅助指标之一.

血清p53抗体的阳性率在肿瘤细胞组织分化程度低、伴有肝脏转移或淋巴结转移的患者中显著升高, 并且与Dukes分期的进展成正相关. 我们发现血清p53抗体在结直肠癌Dukes分期的各个阶段均可出现. 其中在A期的阳性率为14%, B期的阳性率为30%, 并且随分期的进展, 阳性率呈升高趋势. 这说明血清p53抗体的出现是结直肠癌的一种不良生物学特征, 表明肿瘤具有更大的恶性度和侵袭性. Houbiers et al[9]也认为血清p53抗体与肿瘤细胞分化程度, 肿瘤形态, 侵袭血管等恶性生物学行为有关. Kressner et al[10]认为血清p53抗体是独立的预后因素, 术前血清p53抗体水平升高的患者生存期明显缩短. 因此我们主张对于术前血清p53抗体阳性的患者, 应在手术切除后采取辅助性治疗来改善预后.

总之, 我们认为血清p53抗体可以反应结直肠癌的恶性生物学特征, 从而有助于临床判定病情, 指导治疗, 监测疗效. 相信随着对其研究的不断深入, 血清p53抗体的应用将会有更广阔的前景.

备注

编辑: N/A

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