修回日期: 2004-01-09
接受日期: 2004-02-01
在线出版日期: 2004-05-15
目的: 检测单纯慢性浅表性胃炎和胃炎合并十二指肠球部溃疡患者外周血T淋巴细胞亚群水平的变化及炎性细胞因子IL-6和IL-8的血清含量, 分析其与幽门螺杆菌(Hp)的关系, 探讨可能的发病机制.
方法: 收集91例经内镜检查证实慢性浅表性胃炎和十二指肠球部溃疡患者的血清标本, 其中单纯慢性浅表性胃炎75例, 胃炎合并十二指肠球部溃疡16例, 用流式细胞仪测T淋巴细胞亚群的值, 用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-6和IL-8含量, 并分析其与(Hp)的关系.
结果: 胃炎合并十二指肠球部溃疡患者外周血CD8(%)细胞数较正常对照组显著升高, CD4/CD8(%)比值较正常对照组显著降低, 组间比较有显著差异(P<0.01). 单纯慢性浅表性胃炎外周血CD8(%)细胞数、CD4/CD8(%)比值与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05). 胃炎合并十二指肠球部溃疡患者血清白介素-6、IL-8含量与正常对照组比较明显增高, 组间比较有显著性差异(P<0.01).单纯慢性浅表性胃炎IL-8含量与正常对照组比较明显增高, 组间比较有显著性差异(P<0.01). Hp阳性者IL-6含量低于Hp阴性者(P<0.01). Hp阳性者IL-8含量高于Hp阴性者.
结论: 胃炎合并十二指肠球部溃疡患者CD8(%)细胞数较正常人显著升高, CD4/CD8(%)比值较正常人显著降低, 血清IL-6、IL-8含量明显增高. 单纯慢性浅表性胃炎患者IL-8含量明显增高. Hp阳性者IL-8含量增高, 而IL-6含量下降.
引文著录: 戴建宜, 梁晓萍, 文锦丽, 李彩银. T淋巴细胞亚群及炎性细胞因子与慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡的关系. 世界华人消化杂志 2004; 12(5): 1254-1256
Revised: January 9, 2004
Accepted: February 1, 2004
Published online: May 15, 2004
N/A
- Citation: N/A. N/A. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2004; 12(5): 1254-1256
- URL: https://www.wjgnet.com/1009-3079/full/v12/i5/1254.htm
- DOI: https://dx.doi.org/10.11569/wcjd.v12.i5.1254
慢性浅表性胃炎和十二指肠球部溃疡是一种常见的肠道炎症性疾病, 其发病率有逐年升高的趋势. 研究发现胃炎合并十二指肠球部溃疡患者抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)的阳性率为60-85%, 提示该病可能与自身免疫反应有关. 研究者还发现消化性溃疡患者细胞免疫调节异常. 炎症递质和抗炎症递质失衡是溃疡形成的主要因素.胃炎合并十二指肠球部溃疡患者复发率高, 除基本病因未去除外, 不能及时清除由致病因素所致的炎症细胞因子可能起着更为重要的作用. 本研究应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群, 应用酶联免疫黏附法(ELISA)检测患者血清白介素(IL)-6和IL-8含量, 并与正常对照组进行比较, 以探讨慢性浅表性胃炎和胃炎合并十二指肠球部溃疡细胞免疫调节的变化及炎性细胞因子的血清含量, 并分析其与幽门螺杆菌(Hp)的关系, 探讨可能的发病机制.
我院2003-02/07经内镜检查证实单纯慢性浅表性胃炎75例, 胃炎合并十二指肠球部溃疡16例, 年龄21-84岁, 平均37.5岁, 其中男51例, 女40例. 胃镜下观察91例患者诊为慢性浅表性胃炎75例, 胃炎合并十二指肠球部溃疡活动期16例. 91例患者全部分别进行胃黏膜活检尿素酶快速检测法及C14UBT(碳14呼气试验)二者符合率100%. Hp阳性判定采用两种方法:一种方法为: 选用上海市原子核研究所产的ＳＮ－6918Hp测试仪, 患者于空腹状态下口服尿素胶囊, 25 min后检测C14, 正常值为小于100 dpm/mmol CO2 . 另一种方法为: 福建三强生物化工有限公司生产的胃幽门螺杆菌PH指示剂法诊断试剂盒, 取材部位为胃镜下幽门胃窦侧3 cm以内的胃窦黏膜2块, 置于加入酶促反应液的小孔内, 采用目测法, 无显色反应呈黄色者为阴性; 呈浅红色的玫瑰红色反应为阳性. IL-6、IL-8 ELISA试剂盒为晶美产品. 试剂CD3-FITC/CD4-PE、CD3-FITC/CD8-PE及其同型阴性对照MsIgG-FITC/MsIgG-PE 均购自苏州生物基因有限公司. 流式细胞仪型号为ACTRA(Backman Coulter 公司). 自动酶联仪(Wellscan mk3)和自动洗板机为芬兰LANDYSTEMS公司产品.
采集受检患者和正常对照组的外周静脉血, 以肝素管和干燥管各取2 mL, 取专用试管3支, 分别加入CD3-FITC/CD4-PE、CD3-FITC/CD8-PE及其同型阴性对照各20 mL, 立即加肝素抗凝血100 mL并充分混匀后, 室温下避光放置20 min, 每管内加溶血剂(7g/L氯化铵, 自配)2-3 mL, 充分混匀, 避光放置15 min, 离心去上清液, 用PBS洗涤2次后, 加PBS 1 mL 30 min后上机检测流式细胞仪计数. 检测前常规对流式细胞仪进行质量监控和双色荧光补偿, 使其均在允许范围内. 干燥管以3 000 r/min 离心15 min, 去沉淀, 吸取血清, 以500 mL/安瓿存储于-20 ℃低温冰箱中, 避免反复冻溶, 测定时在室温下自融. 加入100 mL待测血清、标准品和对照品; 加入100 mL稀释后的生物素标记的IL-8抗体; 室温下孵育1 h; 冲洗3遍; 加入100 mL亲和素标记的HRP; 室温下孵育30 min; 冲洗3遍; 加入100 mL待用的TMB, 避光显色15 min; 加入50 mL硫酸终止反应; 测定450 nm处的光密度值.
统计学处理 两组间对比, 和治疗前后比较用组间t检验, P<0.05为有显著性差异.
慢性浅表性胃炎和十二指肠球部溃疡患者外周血T淋巴细胞亚群CD8(%)细胞数较正常人显著升高; CD4/CD8(%)比值较正常人显著降低(表1).
从表1可见: 胃炎合并十二指肠球部溃疡患者外周血CD8(%)细胞数为: 37. 15±5. 21; 慢性浅表性胃炎外周血CD8(%)细胞数为: 26. 05±8. 22; 正常对照组外周血CD8(%)细胞数25.66±6.49. 结果显示:胃炎合并十二指肠球部溃疡患者外周血CD8(%)细胞数升高.
胃炎合并十二指肠球部溃疡组血清IL-6含量明显高于正常对照组404.86±353.9 vs 260.50±284.8; 血清IL-8含量明显高于正常对照组(1563.1±938.0 vs 750.5±122.3, P<0.01). 慢性浅表性胃炎组血清IL-8含量明显高于正常对照组(1327.0±542.0 vs 750.5±122.3, P <0. 01). 结果显示胃炎合并十二指肠球部溃疡组血清IL-6含量、IL-8含量明显升高, 慢性浅表性胃炎组血清IL-8含量升高.
Hp阳性者IL-6含量为: 248.02±283.22, 阴性者IL-6含量为530.5±344.2 (P<0.01). Hp阳性者IL-8含量为: 1733.9±903.2, 阴性者IL-8含量为: 1143.4±980.03(P<0.01). 结果显示幽门螺杆菌阳性者IL-6含量降低, IL-8含量升高.
在慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡的发病机制中, 免疫调节异常起着相当重要的作用, CD4T细胞的激活在肠黏膜组织损伤中的作用尤为重要. CD4/CD8 比值是反映T淋巴细胞功能状态的重要标志. 并且CD4和CD8还是传递递质机制的关键因素, 无论T淋巴细胞如何应答, 都可能在决定持续性黏膜免疫反应中起重要作用[1-2]. 本研究结果显示:胃炎合并十二指肠球部溃疡患者外周血中CD8显著升高导致CD4/CD8比值降低, 引起T淋巴细胞亚群间比例紊乱, 免疫调节异常. 胃炎合并十二指肠球部溃疡患者有一定的遗传易感性, 在外界感染等因素的刺激下, 患者的免疫反应发生异常, 核因子(NF)-kB是这一反应的启动因子. 在NF-κB的作用下, 肥大细胞激活并释放肿瘤坏死因子(TNF)-a和IL-1b, 后二者则进一步激活辅助性T细胞, 释放细胞因子IL-2、IL-3、IL-4、IL-6和IL-8等[3-4].
IL-6是一种单链糖蛋白、多功能细胞因子, 分子量为26 kD, 是细胞因子网络中的关键成分, 主要由T、B淋巴细胞和单核巨噬细胞、纤维母细胞合成. 正常情况中, 这些细胞不产生或很少产生IL-6, 其主要作用是诱导激活T、B淋巴细胞和促进肝细胞合成血浆蛋白等. 过量的IL-6产生与许多疾病有关. 有研究发现, Hp阳性者胃黏膜活检组织培养上清液中IL-6含量显著高于Hp阴性者, 且Hp感染者胃窦黏膜IL-6 mRNA表达水平也明显高于对照组[5]. 本研究表明:胃炎合并十二指肠球部溃疡患者的血清IL-6含量明显增高. Hp阳性者IL-6含量较Hp阴性者低的原因可能与患者用药有关.
IL-8主要由单核巨噬细胞产生, 其他如成纤维细胞、上皮细胞和内皮细胞等在一定的刺激条件下也可产生IL-8. IL-8的主要生物学活性是吸引和激活中性粒细胞. 中性粒细胞与IL-8接触后发生形态变化, 定向游走到反应部位并释放一系列活性产物, 这些作用可导致机体局部炎症反应, 达到杀菌和损伤细胞的目的. 此外, IL-8对嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和淋巴细胞也有一定作用. Jones et al[6-8]研究表明IL-8是溃疡性结肠炎发生过程中必不可少的炎症递质, 无论是在血清、粪便, 还是组织中, 患者IL-8含量均明显增高. 本研究表明慢性浅表性胃炎和胃炎合并十二指肠球部溃疡患者的血清IL-8含量均增高. Hp阳性者IL-8含量增高.
细胞因子与慢性浅表性胃炎和十二指肠球部溃疡发病过程密切相关, 他们构成的复杂细胞因子网络相互促进或抑制, 从而在致病过程中发挥作用. 随着细胞因子研究的不断深入及与Hp关系的进一步阐明, 细胞因子有可能应用于Hp相关性疾病的诊断同时也可能应用某些细胞因子的拮抗剂来阻断Hp的致病过程或治疗Hp相关性疾病.
| 1. | Weston AP, Biddle WL, Bhatia PS, Miner PB Jr. Terminal ileal mucosal mast cells in irritable bowel syndrome. Dig Dis Sci. 1993;38:1590-1595. [PubMed] [DOI] |
| 3. | Rogler G, Brand K, Vogl D, Page S, Hofmeister R, Andus T, Knuechel R, Baeuerle PA, Schölmerich J, Gross V. Nuclear factor kappaB is activated in macrophages and epithelial cells of inflamed intestinal mucosa. Gastroenterology. 1998;115:357-369. [PubMed] [DOI] |
| 4. | Schreiber S, Nikolaus S, Hampe J. Activation of nuclear factor kappa B inflammatory bowel disease. Gut. 1998;42:477-484. [PubMed] [DOI] |
| 5. | Yamaoka Y, Kita M, Kodama T, Sawai N, Imanishi J. Helicobacter pylori cagA gene and expression of cytokine messenger RNA in gastric mucosa. Gastroenterology. 1996;110:1744-1752. [PubMed] [DOI] |
| 6. | Jones SC, Evans SW, Lobo AJ, Ceska M, Axon AT, Whicher JT. Serum interleukin-8 in inflammatory bowel disease. J Gastroenterol Hepatol. 1993;8:508-512. [PubMed] [DOI] |
| 7. | Keshavarzian A, Fusunyan RD, Jacyno M, Winship D, MacDermott RP, Sanderson IR. Increased interleukin-8 (IL-8) in rectal dialysate from patients with ulcerative colitis: evidence for a biological role for IL-8 in inflammation of the colon. Am J Gastroenterol. 1999;94:704-712. [PubMed] [DOI] |
| 8. | Katsuta T, Lim C, Shimoda K, Shibuta K, Mitra P, Banner BF, Mori M, Barnard GF. Interleukin-8 and SDF1-alpha mRNA expression in colonic biopsies from patients with inflammatory bowel disease. Am J Gastroenterol. 2000;95:3157-3164. [PubMed] [DOI] |