胃黏膜活检常规HE染色对幽门螺杆菌感染的诊断价值

摘要

目的: 探讨胃黏膜活检常规染色(HE染色)对幽门螺杆菌(Hp)感染的诊断价值.

方法: 收集门诊行胃镜检查同时行¹³C尿素呼吸试验(UBT)的患者共262例, 胃镜检查同时取胃窦组织分别行PCR检测和HE染色进行Hp感染的诊断, 并以UBT和PCR的结果为标准评估HE染色对Hp感染的诊断价值.

结果: ¹³C-UBT和PCR检查结果均为阳性者150例, 均为阴性者106例, 其中常规HE染色发现Hp阳性115人, 阴性141人. HE染色对Hp感染诊断的敏感性为72.0% (108/150), 特异性为93.4%(99/106), 阳性预测值(PPV)为93.9%(108/115), 阴性预测值(NPV)为70.2%(99/141), 诊断的准确性为80.9%(207/256).

结论: 在行常规病理诊断的同时行Hp感染的诊断, 是一种值得推广的方法. 但由于此方法敏感性稍低, 因此对一些与Hp密切相关的上消化道疾病如果HE染色不能发现Hp感染, 则还需进一步行其他检查.

关键词: N/A

N/A

N/A

Correspondence to: N/A

Received: December 23, 2003
Revised: January 9, 2004
Accepted: February 1, 2004
Published online: May 15, 2004

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)与消化道疾病关系密切, 因此对Hp感染的诊断日益重要, 常用的诊断方法有快速尿素酶试验、组织学检查(特殊染色)、细菌分离培养、¹³C或¹⁴C尿素呼吸试验(UBT)、血清学试验、PCR、粪便抗原检测等, 但不论用何种方法都需要多取胃黏膜组织或费用较高, 因此在进行常规胃黏膜组织病理检查(HE染色)的同时直接进行Hp感染的诊断, 有较高的实用价值. 本研究以¹³C尿素呼吸试验和PCR检查结果作为标准对照, 探讨胃黏膜活检常规HE染色对Hp感染的诊断价值.

1 材料和方法

1.1 材料

所有患者均系我院门诊1999-03/2001-09因上腹不适而行胃镜检查者, 共262例, 其中男137例, 女125例, 年龄16-82岁, 平均年龄46.3岁. 全部患者均行13C-UBT, 并在胃镜检查时取胃窦黏膜组织2-3块. 所有患者在试验前1 mo内未服用抗生素, 2 wk内未服用铋剂、H₂受体拮抗剂和质子泵抑制剂.

1.2 方法

1.2.1 ¹³C-UBT: 受检者隔夜空腹, 将75 mg¹³C-尿素溶于100 mL 0.1 moL/L的枸橼酸溶液. 饮用试剂前、后30 min留取呼气样本, 气体吹入10 mL玻璃管内, 呼气样本经核素比值质谱仪分析, ¹³CO₂丰度(δ‰)以所测得标本的¹³CO₂/¹²CO₂值与国际标准PDB(Pee Dee Belemnite)比较得出. 用30 min的δ值减去空腹的δ值即得出其差值(DOB). DOB 大于或等于4‰为Hp阳性判定值.

1.2.2 PCR检测: 将胃黏膜活检组织用1 mL匀浆器研成匀浆, 经蛋白酶K消化过夜后, 煮沸灭活蛋白酶K, 快速冷却, 取上清液扩增, 分别以标准模板和无菌去离子水作阳性和阴性对照. 取全部扩增水相进行凝胶电泳, 在与标准模板同一水平出现电泳带为阳性, 否则为阴性.

1.2.3 HE染色对Hp感染的诊断: 对胃窦黏膜活检组织甲醛固定后常规石蜡包埋, 连续切片5张, HE染色, 由一名有经验的病理科医师在不知道UBT和PCR结果的情况下, 观察胃黏膜的黏液层、表面上皮、小凹上皮和腺管上皮, 根据能否看见Hp诊断有无Hp感染.

1.3 结果判断

以¹³C-UBT和PCR检测结果均为阳性作为Hp阳性, 二者均为阴性作为Hp阴性, 二者结果不一致者予以剔除, 以此结果为标准按经典方法计算HE染色诊断Hp感染的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性似然比(+LR)、阴性似然比(-LR)、诊断的准确性和正确诊断指数(g), 并进行Kappa分析.

2 结果

¹³C-UBT检查和PCR检查结果均为阳性者150例, 均为阴性者106例, 另有6例结果不一致, 予以剔除. 256例患者中, 常规HE染色发现Hp阳性115例, 阴性141例 (表1), HE染色对Hp感染诊断的敏感性为72.0% (108/150), 特异性为93.4%(99/106), PPV为93.9% (108/115), NPV为70.2%(99/141), +LR为10.9, -LR为0.3, 诊断的准确性为80.9%(207/256), g = 0.654. 所得结果进行Kappa分析, K值为0.624, 说明诊断的一致性良好.

表1 HE染色法检测Hp的结果.

HE 实际	+	-	合计
+	108	7	115
-	42	99	141
合计	150	106	256

3 讨论

目前Hp感染诊断的方法无论是侵入性还是非侵入性, 各有其优缺点[1-6]. 细菌培养是诊断Hp感染的"金标准", 其特异性为100%, 但其敏感性受到实验室条件、标本运送时间和条件、标本采集的部位和数量等条件的限制, 只能达到70-92%, 而且该方法所需时间长、价格昂贵, 临床实用性不大[7]. UBT检测是目前公认抗Hp治疗后诊断的"金标准", 不受胃内Hp分布不均匀的影响, 其特异性和敏感性均能达到90-100%, 但该方法需要有专用设备, 检测前2-4 wk内口服抗生素、铋剂或质子泵抑制剂可能导致假阴性结果, 胃内出现其他尿素酶阳性细菌生长时可能导致假阳性结果[8-9]. PCR是目前诊断Hp感染敏感性和特异性(均能达到96-100%)均较高的方法, 但由于操作复杂、费用贵, 多用于科研[10]. 临床上常用的方法为快速尿素酶实验(RUT)和病理形态学检查, RUT的敏感性为89-98%, 特异性为93-98%; 形态学检查的敏感性和特异性也能达到93-98%, 目前常用的形态学检查方法有Warthin-Starry银染、Giemsa染色、改良甲苯胺蓝染色等[11-12], HE染色对Hp感染的诊断价值各家报道不一致, 李惠珍et al[13]报道胃组织常规HE染色诊断准确率为95%、敏感性为96%, 李子俊et al[14]用组织涂片HE染色Hp检出率为63.85%, 国外Fallone et al[15]报道HE染色诊断Hp感染的准确率为92%, 敏感性为93%. 为了准确评价HE染色对Hp感染的诊断价值, 我们选用诊断敏感性和特异性均较高的PCR和UBT方法进行评估, 结果表明, HE染色对Hp感染诊断的敏感性为72.0%, 特异性为93.4%, PPV为93.9%, NPV为70.2%, 诊断的准确性为80.9%, +LR为10.9, -LR为0.3, 诊断的准确性为80.9% , g = 0.654, 说明HE染色是一种良好的诊断Hp感染的方法. HE染色由于不增加患者的负担亦不需另取胃黏膜组织, 在进行常规病理诊断的同时即可进行Hp感染的诊断, 既评价感染, 又评估组织学状况, 因此是一种值得推广的诊断方法[16], 但由于取材的局限性、病理医师的诊断经验、胃内其他螺杆菌的影响等问题, 可能造成一定的假阴性和假阳性, 为了提高诊断的准确性, 可根据情况适当增加活检的数量[17], 另外在其他染色方法中有作者[18]发现延长染色时间可提高诊断的阳性率, HE染色时间对Hp的诊断有无影响尚有待进一步观察, 同时由于Hp只定植于正常胃黏膜, 如果活检组织有肠化生和/或不典型增生, 势必对Hp诊断有一定影响, 因此对一些与Hp密切相关的上消化道疾病如果常规病理检查不能发现Hp感染, 则还需进一步行其他检查[19].

备注

$[Footnotes]

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