修回日期: 2002-12-20
接受日期: 2002-12-25
在线出版日期: 2003-06-15
了解乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV DNA与抗原抗体标志物的关系及评价HBV DNA检测的临床应用价值.
应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测1 474例HBV感染者血清HBV DNA, 同时采用酶联免疫黏附试验(ELISA)技术检测HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc.
603例HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性标本中, HBV DNA阳性520例(86.2%); 465例HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性标本中, HBV DNA阳性163例(35.1%); 216例HBsAg、抗HBc阳性标本中, HBV DNA阳性88例(40.7%); 26例单项抗HBc阳性标本中HBV DNA阳性3例(11.5%).
HBV DNA检测可填补抗原抗体标志物检测的不足, 对临床诊断具有重要价值.
引文著录: 陈雪娟, 李刚, 刘淑芳, 陈文思, 李桂侠. HBV感染者HBV DNA与抗原抗体标志物的关系. 世界华人消化杂志 2003; 11(6): 870-871
Revised: December 20, 2002
Accepted: December 25, 2002
Published online: June 15, 2003
N/A
- Citation: N/A. N/A. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2003; 11(6): 870-871
- URL: https://www.wjgnet.com/1009-3079/full/v11/i6/870.htm
- DOI: https://dx.doi.org/10.11569/wcjd.v11.i6.870
乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一, 在我国发病率高, 危害大[1-3]. 目前HBV感染的实验诊断主要采用ELISA法检测抗原抗体, 同时, 随着抗病毒药物的开发和逐渐普及应用, HBV DNA的检测越来越受到重视, HBV DNA是HBV存在的最直接的证据, 亦是HBV复制和具有传染性的标志. 采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测HBV DNA, 具有很高的敏感性、特异性和重复性, 克服了常规PCR法只定性不定量及存在假阳性的缺点[4-6]. 本文采用荧光定量PCR法检测了1474例HBV感染者血清HBV DNA, 同时用ELISA法测定免疫学标志(HBVM), 结果报告如下.
本院传染科门诊及住院患者, 共1474例, 男1036例, 女438例, 年龄4-82岁. 急性乙型肝炎64例, 慢性乙型肝炎566例, 慢性乙肝病毒携带者638例, 肝炎肝硬化42例, 健康体检及其他肝病者164例, 诊断符合2000年(西安)第十次全国病毒性肝炎及肝病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准.
荧光定量试剂盒由广州中山大学达安基因诊断中心提供, 原理与方法见文献[4], 正常参考值为1×103拷贝/mL, 所用仪器为PE5700自动荧光PCR仪(美国PE公司), 乙型肝炎病毒血清学标志(HBV-M)ELISA试验盒由北京万泰试剂公司提供, 检测过程按说明操作.
急性乙型肝炎64例, 血清HBV DNA阳性者59例, 阳性率92.2%, 慢性乙型肝炎566例, HBV DNA阳性330例, 阳性率58.3%; 慢性乙肝病毒携带者638例, HBV DNA阳性366例, 阳性率57.3%; 肝炎肝硬化42例, HBV DNA阳性39例, 阳性率92.8%; 健康体检者及其他肝病患者164例, HBV DNA阳性9例, 阳性率5.4%.FQ-PCR检测血清HBV DNA与酶免疫黏附检测HBV-M结果比较见表1.
| HBsAg | HBeAg | HBcAb | HBsAb | HBeAb | n | HBV DNA(+)n(%) | |
| 1 | + | + | + | - | - | 603 | 520 (86.2) |
| 2 | + | - | + | - | + | 465 | 163(35.1) |
| 3 | + | + | - | - | - | 19 | 18(94.2) |
| 4 | + | - | + | - | - | 216 | 88(40.7) |
| 5 | + | - | - | - | + | 5 | 3(60) |
| 6 | - | - | + | + | + | 20 | 1(5) |
| 7 | - | - | + | + | - | 27 | 1(3.7) |
| 8 | - | - | + | - | + | 24 | 2(8.0) |
| 9 | - | - | - | + | + | 1 | 0(0) |
| 10 | - | - | - | + | - | 56 | 2(3.57) |
| 11 | - | - | + | - | - | 26 | 3(11.5) |
| 12 | + | + | + | + | - | 2 | 2 (100) |
| 13 | - | - | - | - | - | 10 | 0(0) |
| 合计 | 1 474 | 803 |
采用ELISA法检测HBV-M在临床上多年来已得到广泛应用, 在诊断HBV感染中起了很大作用. HBeAg是病毒复制和具有传染性的标志, HBeAg的存在与HBV DNA检出率具有很好的相关性[7-11]. 本文检测HBsAg和HBeAg阳性者624例, HBV DNA阳性540例, 阳性率86.5%, 而HBsAg阳性, HBeAg阴性, HBeAb阳性470例, HBV DNA阳性166例, 阳性率35.3%. HBeAg阳性的HBV DNA明显高于阴性的标本, 二者比较具有统计学差异. 因此, 当没有条件开展FQ-PCR技术检测HBV DNA时, ELISA法检测HBV-M仍有很大意义. 模式HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性603例, HBV DNA检测阳性率为86.2%, 而模式HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性465例, HBV DNA阳性率为35.1%, 这说明并不是所有"大三阳"的患者HBV都处于复制期具有传染性, 也不是所有"小三阳"的患者HBV都无复制, 所以, 要准确知道患者是否处于复制期, 最准确的方法还是检测HBV DNA.HBsAg阴性仍不能排除HBV的复制, 本文调查发现在164例HBsAg、HBeAg均阴性标本中, 9例检出HBV DNA阳性, 证实了HBsAg阴性者仍有可能存在HBV感染. 另外还发现在56例仅HBsAb阳性的标本中, HBV DNA阳性2例, 占3.6%, 过去认为HBsAb存在即表示患者康复并且有免疫力, 目前有学者认为极少数HBV感染者, 即使血清中HBsAg向HBsAb转换后, HBV DNA复制仍可持续存在, 或感染了HBV S区变异株, 提示HBsAb阳性仍有必要检测HBV DNA, 只有血清中产生了HBsAb, 同时HBV DNA阴性, 才能说明病毒已不存在[12-18].
HBsAg和HBeAg均阳性而HBV DNA阴性的情况, 有资料研究表明可能有以下原因. (1)干扰素或拉米夫定等治疗后病毒复制受抑制. (2)PCR所用引物相应的DNA序列发生突变, 此引物与突变DNA不能配对结合. (3)病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体而血中游离HBV DNA很少或缺乏.
| 3. | 张 树林, 李 义方. 乙型肝炎血清学标志临床意义的再认识. 国外医学流行病学传染病分册. 1993;20:57. |
| 5. | 刘 敬忠, 谭 淑珍, 吴 燕, 何 蕴韶, 肖 白, 周 艳, 雷 箴, 闫 梅, 邵 伟. 荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA. 中华微生物学和免疫学杂志. 2001;21:690-692. |
| 13. | 周 平, 张 木森, 蔡 庆, 陈 友纯, 李 晓娟, 于 建国, 关 键, 刘 春灵. PCR检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义. 华人消化杂志. 1998;6:263-264. |