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世界华人消化杂志. 2003-06-15; 11(6): 856-858
在线出版日期: 2003-06-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i6.856
肝病患者血清肿瘤坏死因子α水平变化
徐学刚, 张美稀, 董惠芳, 杨协珍, 金树根, 陈建杰, 王灵台
徐学刚, 启东市人民医院 江苏省启东市 226200
张美稀, 平阳县中医院 浙江省平阳县 325400
董惠芳, 杨协珍, 金树根, 陈建杰, 王灵台, 上海中医药大学附属曙光医院 上海市 200021
通讯作者: 徐学刚, 226200, 江苏省启东市人民医院.
电话: 0513-3315686
收稿日期: 2002-11-14
修回日期: 2002-11-20
接受日期: 2002-12-07
在线出版日期: 2003-06-15

目的

通过观察肝病患者血清肿瘤坏死因子α变化来分析其在肝脏损伤诊治应用中的临床意义

方法

采用ELISA法来检测肝病患者血清肿瘤坏死因子α水平.

结果

肝病患者血清TNFα水平上升, 而以伴细菌感染的失代偿期肝硬化患者上升最为显著.相关分析发现, 血清TNFα上升与急性肝损伤(ALT、AST、AKP、GGT)指标无明显相关性, 与免疫细胞激活和慢性炎症指标(PBMC活化、γ球蛋白、IgG、IgA、CIC)和肝纤维化(HA)及肝再生(AFP)正相关, 而与肝合成指标(白蛋白、前白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白E)和血象(粒细胞、红细胞、血小板)和免疫应激/消耗指标(淋巴细胞CD4+CD28+、α2球蛋白、β球蛋白、补体C3)负相关.

结论

血清TNFα在肝病的诊治应用意义有限, 主要反映受内毒素等毒素刺激网状内皮系统致其激活的程度, 不宜应用于肝损伤程度和治疗效果的评定.

关键词: N/A
引文著录: 徐学刚, 张美稀, 董惠芳, 杨协珍, 金树根, 陈建杰, 王灵台. 肝病患者血清肿瘤坏死因子α水平变化. 世界华人消化杂志 2003; 11(6): 856-858
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: November 14, 2002
Revised: November 20, 2002
Accepted: December 7, 2002
Published online: June 15, 2003

N/A

Key Words: N/A
0 引言

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNFα)最早认为是单核巨噬细胞产生的一炎性细胞因子, 因与肿瘤患者消瘦密切有关, 以前曾被作为恶液质(cachexia)因子. TNFα通过其胞膜受体TNFαRⅠ和TNFαRⅡ发挥其生物学效应.既往大量临床和实验研究表明, 肝炎等肝脏疾病患者肝内有大量TNFα产生并参与肝损伤的病理发生发展, 与肝炎和肝硬化及肝癌发生发展密切相关[1-6]. 为明确TNFα在不同类型肝脏疾病中的病理作用, 为防治与TNFα密切相关肝损伤的治疗策略的制订提供合适的诊断和治疗效果评判用指标, 我们采用ELISA法检测了50例肝病患者外周血浆肿瘤坏死因子α水平, 兹报告如下并就其临床意义予以评价.

1 材料和方法
1.1 材料

本院肝科门诊和住院肝病患者48例, 男35例, 女13例, 年龄27-73(37±22)岁, 其中急性肝炎8例, 慢性乙型肝炎活动期12例, 慢性乙型肝炎静止/缓解期11例, 肝炎后肝硬化活动期11例, 恶性肿瘤6例(原发性肝癌3例, 胃肠肿瘤肝转移3例); 对照组8例, 男5例, 女3例, 年龄25-54(36±19)岁, 系来院门诊体检并排除心、肝、肾等重大疾患的正常健康人.

1.2 方法

(1)常规肝科检测项目: 包括血常规、肝功能、免疫球蛋白、补体、血脂、透明质酸(HA)和TNFα等, 其中TNFα采用ELISA法, 试剂盒采用博力公司提供的(美国RNDSYSTEMS)进口分装试剂盒; (2)血液外周血单个核细胞胞膜CDs的流式细胞仪检测: 包括CD4(FITC)、CD8(FITC)、CD28(PE)、CD25(FITC)、CD45RA(FITC)、CD45RO(FITC)单染法测定, 采用美国COULTER公司的流式细胞仪(EPICS-XL型)和专供荧光标记小鼠抗人CDs流式仪检测试剂(其中检测CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD45RA、CD45RO小鼠单抗克隆号分别是UCHT1、13B8.2、B9.11、B1.49.9、CD28.8、ALB11、UCH1), 由专人进行外周血单个核细胞胞膜CDs检测.

统计学处理 数据采用微机全部输入SPSS数据库, 计量资料齐性检验后进行方差分析和两两比较及相关性分析.

2 结果
2.1 肝病患者血清TNFα水平变化

见表1.

表1 肝病患者血清TNFα水平变化(mean±SD, pg/mL).
急性肝炎活动期慢乙肝静止期慢乙肝活动期肝硬化原发性肝癌对照组
TNFα9.7±5.66a19.3±21.02a12.2±1.15a393.3±319.5217.4±14.76a6.2±3.21a
aP<0.01 vs 活动期肝硬化, 其中活动性肝硬化组中伴明显细菌感染者其血清TNFα均>500 pg/mL.
2.2 活动期肝硬化血清TNFα水平变化的特异性分析

见表2.

表2 活动期肝硬化血清TNFα水平变化的特异性分析.
组别与项目活动期肝硬化特异性
血清TNFα=>50 pg/mL87.5%
血清TNFα=>100 pg/mL100%
2.3 与血清TNFα水平变化与正相关的有关指标

包括γ球蛋白(γ-gobulin R = 0.700, P<0.01)、淋巴细胞CD4+(R = 0.250, P<0.05)、单核细胞CD4+(R = 0.490, P<0.01)、单核细胞CD8+ (R = 0.534, P<0.01)、粒细胞CD8+(R = 0.443, P<0.02)、淋巴细胞CD45RA(R = 0.247, P<0.05)、单核细胞CD45RA+(R = 0.549, P<0.01)、单核细胞CD45RO+(R = 0.517, P<0.01)、粒细胞CD25+(R = 0.319, P<0.05)、CD45Ra/CD45RO(R = 0.251, P<0.05)、淋巴细胞(R = 0.401, P<0.01)、IgG(R = 0.469, P<0.01)、IgA(R = 0.441, P<0.01)、CIC(R = 0.407, P = 0.05)、透明质酸(HA, R = 0.343, P<0.05)、甲胎蛋白(AFP, R = 0.798, P<0.01)等.

2.4 与血清TNFα水平变化负相关的有关指标

包括白蛋白(Albumin, R = -0.574, P<0.01)、前白蛋白(PA, R = -0.237, P<0.05)、α2球蛋白(α2-gobulin, R = -0.459, P<0.05)、β球蛋白(β-gobulin, R = -0.341, P>0.05)、淋巴细胞CD4+CD28+(R = -0.553, P<0.01)、粒细胞(G, R = -0.385, P<0.01)、红细胞(RBC, R = -0.655, P<0.01)、血小板(PLT, R = -0.651, P<0.01)、补体C3(C3, R = -0.451, P<0.01)、总胆固醇(T chol, R = -0.356, P>0.05)、甘油三酯(TG, R = -0.348, P>0.05)、载脂蛋白E(APOE, R = -0.544, P<0.01)等.

3 讨论

我们采用ELISA法检测血清TNFα, 发现肝病患者血清TNFα水平上升, 而以伴细菌感染的失代偿期肝硬化患者上升最为显著. 相关分析发现, 血清TNFα上升与急性肝损伤(ALT、AST、AKP、GGT)指标无明显相关性, 与免疫细胞激活和慢性炎症指标(PBMC活化、球蛋白、IgG、IgA、CIC)和肝纤维化(HA)及肝再生(AFP)正相关, 而与肝合成指标(白蛋白、前白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白E)和血象(粒细胞、红细胞、血小板)和免疫应激/消耗指标(淋巴细胞CD4+CD28+、α2球蛋白、球蛋白、补体C3)负相关.

既往大量研究结果表明, 肝脏疾病时多伴有外周血液中TNFα水平的升高, 与肝脏炎症活动尤其内毒素血症密切相关[7]. 虽然最近有研究发现T淋巴细胞如CD4+和CD8+CTL及HBx蛋白诱导的肝细胞均亦产生TNFα, 我们的检测结果发现只有伴有细菌感染的失代偿期肝硬化患者上升最为显著, 说明内毒素刺激单核巨噬细胞致TNFα大量释放入血是血清TNFα上升的主要原因[8,9].

血清TNFα变化与急性肝损伤指标无明显相关性的原因, 我们认为与可溶性(soluble)TNFα(sTNFα)相比, 膜型TNFα(membrane-typeTNFα, mtTNFα)或与TNF家族成员中其他成分如FAS、CD40-L、TRAIL等与肝损伤关系更密切[10], 此一现象在动物实验中免疫性肝损伤的治疗干预中肝损伤改善时而血清TNFα不显改善所证实[11], 而阻止mtTNFα向sTNFα转化的金属蛋白酶抑制剂在有效降低血清TNFα水平同时却加重肝损伤[12], 更说明肝内mtTNFα增加才是肝损伤的主要原因, 而TNFα拮抗剂对急性移植物抗宿主病防治效果不如其对慢性移植物抗宿主病的防治效果[13,14], TNFα对实验性肿瘤的促进作用等现象均进一步表明TNFα在慢性组织病变尤其是癌变过程中有促进作用[15-18], 更进一步证实血清TNFα不是一个良好的反映肝损伤指标. 虽然阻抑mtTNFα向sTNFα转化的药物干预不利于肝损伤, 但阻抑mtTNFα表达的治疗方法能有效地防治重症肝衰竭而降低其死亡率[19-21].

血清TNFα与慢性炎症中的纤维化及再生等有关指标的良好相关性, 说明TNFα参与慢性炎症中纤维化和再生事件过程, 因而阻抑mtTNFα表达或TNFR表达(即拮抗TNFα效应)的药物如酞胺哌啶酮(沙利度胺, thalidomide)、糖皮质激素(glucocorticoids)、己酮可可碱(pentoxifylline, PTX)、秋水仙碱(colchicine)、β受体阻滞剂(βreceptor blocker)、山莨菪碱(654-2)、腺苷(adenosine)及各种天然和合成抗氧化剂(antioxidants)等均有助于肝脏等慢性组织病变如肝纤维化、门脉高压、肝硬化、肝癌的防治, 目前已有大量实验研究证实阻抑TNFα表达或拮抗TNFα效应能有效防治肝纤维化和门脉高压及肝癌[21-24], 而免疫治疗肝纤维化病变致血清TNFα升高, 再次说明血清TNFα不是一个良好的反映肝损伤指标[25]. 因此我们认为血清TNFα在肝病的诊治应用意义有限, 主要反映网状内皮系统受内毒素(及外毒素？)等刺激, 用于肝损伤程度和治疗效果的评定似欠妥当.

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