胃液抗Hp IgA测定对Hp根除治疗效果的判断

摘要

目的

为探讨胃液抗Hp IgA测定对Hp根除治疗效果判断的价值.

方法

采用间接ELISA法检测了65患者Hp根除前后胃液抗Hp IgA.

结果

(1)Hp根除后胃液抗Hp IgA含量显著低于治疗前(0.465和0.173, P<0.001); (2)Hp根除后胃液抗Hp IgA阳性率由治疗前的94.29%降至22.86% (P<0.001); (3)Hp未根除者及Hp阴性者其胃液中抗Hp IgA在治疗前后无显著差异(P>0.05).

结论

胃液中抗HpIgA含量能反映当时胃内Hp感染情况, 可作为Hp是否根除的判断标志.

关键词: N/A

N/A

N/A

Corresponding author: N/A

Received: December 24, 2002
Revised: December 30, 2002
Accepted: January 3, 2003
Published online: November 15, 2003

Abstract

N/A

Key Words: N/A

0 引言

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, 简称Hp)感染与胃炎、消化性溃疡和胃癌的关系日益受到人们的重视[1-4], 根除Hp可改善胃黏膜炎症, 预防溃疡复发, 降低胃癌发病率[5-7], 因此监测抗Hp治疗效果具有重要意义. 我们及国外许多学者的研究已证实Hp感染可刺激胃黏膜局部产生特异性抗HpIgA[8-12], IgA的半衰期比IgG短, 胃液中抗Hp IgA是否会随着Hp的根除而消失这方面的研究报道不多. 本文采用测定胃液中抗Hp IgA用于Hp根除治疗后的监测, 取得了良好的效果, 现报道如下.

1 材料和方法

1.1 材料

随机选择本院胃镜检查者65例, 经胃镜活检孔吸取胃液4-5 mL, 混有血液者弃用. 胃液取出后立即用碳酸氢钠调pH至7, 置-80 °C待测, 并取活检黏膜数块, 做Hp培养、涂片革兰氏染色镜检Hp和病理检查. 所有患者抗Hp治疗停药1 mo后复查胃镜, 复查时再次取胃液和黏膜做同样检查.

1.2 方法

1.2.1 胃黏膜内Hp菌检测 活检黏膜直接涂片检查及Hp的分离培养鉴定均参照张振华et al [13] 所报道的方法. 细菌培养阳性或涂片中见大量典型细菌者方确认阳性, 二者均为阴性者方确认为阴性.

1.2.2 ELISA 方法 从患者胃黏膜中培养出的7株Hp菌分离纯化, 超声粉碎后在4 °C下15 000 g离心30 min, 取上清蛋白定量后作抗原. 该抗原用SDS-PAGE法分析主要蛋白带在120 kD、63 kD、28 kD、94 kD. 用50 μg/mL 的抗原包被聚苯乙稀反应板, 用间接ELISA 法测定, 每板均设标准阳性和标准阴性对照, 将二者A值比值作为质控, 每板之间此值的变异系数小于5%.

1.2.3 吸收抑制试验 用7例在ELISA试验中高效价抗Hp IgA的胃液混合后, 分别用Hp, 空肠弯曲菌(Cj)及大肠杆菌完整的细菌和Hp抗原吸收后, 按上述方法做ELISA试验.

1.2.4 结果判断 结果用待测标本A值与标准阳性A值之比来表示. 阳性临界值的确定: 以20例Hp阴性者胃液经Hp菌特异黏咐后, 按上述方法进行ELISA 测定, 以其均数加3倍标准差定为阳性临界值, 该值大于或等于0.145为阳性. 该方法与细菌学检测结果比较其特异性、敏感性和诊断符合率分别为92.9%、96.4%和95.3%[9].

1.2.5 Hp根治方法及根除标准 洛赛克20 mg, 1次/d, 甲硝唑200 mg, 3次/d, 阿莫西林500 mg, 3次/d, 2 wk为1疗程. 治疗结束后1 mo复查胃镜, 分别取胃体和胃窦黏膜做Hp检测, 两处均阴性者为Hp根除.

统计学处理 均数间比较用t检验, 计数资料用x²检验.

2 结果

2.1 抗Hp治疗前后胃液中抗Hp IgA变化

65例患者中55例阳性者经抗Hp治疗后35例Hp根除, 其中27例胃液抗Hp IgA为阴性, 8例仍为阳性. 20例Hp未根除者19例胃液中抗Hp IgA为阳性, 1例阴性, 10例Hp阴性者复查时Hp仍为阴性. 表1反映了治疗前后胃液中抗Hp IgA变化. 经抗Hp治疗Hp根除后其胃液抗Hp IgA含量和阳性率显著低于治疗前(P<0.001), 而Hp未根除者及Hp阴性者其胃液中抗Hp IgA在治疗前后无显著差异(P>0.05). 另外胃液抗HpIgA含量, 在治疗前Hp根除组与未根除组之间无差异(P>0.05), 与Hp阴性组之间有显著差异(P<0.01), 而治疗后已根除组显著低于未根除组(P<0.01), 虽稍高于Hp阴性组, 但无统计学意义(P>0.05).

表1 抗Hp治疗前后胃液抗Hp IgA结果比较.

组别	n	治疗前		治疗后		P值
			阳性数 (%)		阳性数 (%)
Hp已根除	35	0.465±0.184	33 (94.29)	0.173±0.074	8 (22.86)	<0.001
Hp未根除	20	0.458±0.197	19 (95)	0.474±0.201	19 (95)	>0.05
Hp阴性	10	0.113±0.039	1 (10)	0.109±0.035	1 (10)	>0.05

2.2 吸收抑制试验结果

无论是完整的Hp菌还是超声粉碎提取的Hp抗原与Hp阳性者胃液共同温育后都能使胃液中抗Hp IgA效价明显下降, 而用大肠杆菌和Cj吸收后的血清和胃液抗体仅有少许下降, 此结果证明本试验具有特异性.

3 讨论

Hp感染不但可引起机体的全身免疫反应, 而且可引起胃肠道的局部免疫反应, 我们以前的研究[8,9]表明胃液中抗Hp IgA可准确反映内胃内Hp感染情况, 其对Hp感染诊断的特异性. 敏感性和诊断符合率均高于血清学诊断. Hanvivatvong et al [10]的研究也表明胃液中抗Hp IgA诊断Hp感染具有较高的特异性. Perez-Perez et al [11]的研究也发现s1/m1型 VacA阳性的Hp感染者, 胃液中含有高水平的抗VacA IgA. 而本研究进一步表明胃液中抗Hp IgA与血清中Hp抗体不同, Hp根除1 mo后, 胃液内抗Hp IgA迅速下降, 降幅在60%以上. Koizumi et al [14]观察了Hp根除前后血清中抗Hp IgG水平变化, 结果Hp成功根除后3 mo, 血清中抗Hp IgG下降约50%, 可见Hp根除后血液中抗Hp IgG含量下降的速度明显比胃液中抗Hp IgA慢, 这可能是由于IgA在体内的半衰期短. 王丕龙et al [15]的研究表明血清中IgA的变化较IgG快也证实了这一点. 此外胃液中抗Hp IgA为分泌型, 其由胃黏膜内的浆细胞分泌, 而胃黏膜上皮更新快, 当Hp根除后, 抗原刺激不再存在, 原有的黏膜上皮更新后, 抗HpIgA即不再产生, 因此随着Hp的根除其含量迅速下降, 这使其明显的优于血清学检测, 可用于判断Hp是否根除.

抗Hp治疗后Hp是否根除的检测方法目前主要有以下几种: 通过胃镜取活组织进行细菌培养、组织学检测、快速尿素酶试验和PCR检测等. 这些方法均需要进行胃镜检查, 有一定痛苦, 患者不易接受, 此外抗Hp治疗后Hp定植部位上移和Hp呈灶性分布易造成假阴性结果; ¹⁴C和¹³C尿素呼吸试验, 无创伤, 患者依从性好, 结果可靠, 但是前者有一定的放射污染, 后者价格昂贵, 不易普及; 血清Hp抗体测定在Hp根除后仍持续一段时间阳性, 不能反映胃内当时Hp感染情况, 因此不宜作为Hp是否根除的标志. 我们的研究发现Hp根除后患者胃液内抗Hp IgA含量和阳性率均显著下降, 而未根除Hp者胃液中抗Hp IgA无显著变化, 说明胃液中抗Hp IgA含量能反映当时胃内Hp感染情况, 可作为Hp是否根除的判断标志.

备注

$[Footnotes]

参考文献

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