自然杀伤细胞抑制肝癌肺转移

图1 NK细胞的分离和培养. A: CD56⁺ CD3^-标记的单个核细胞为NK细胞. NK细胞占外周血单个核细胞10%-30%. 个别样本的NK细胞比例>30%; B: 经过分离的NK细胞的纯度>95%; C: NK细胞在培养基里呈悬浮成簇生长(×100). NK: 自然杀伤细胞.

图2 体外NK细胞抑制MHCC97-H增殖、迁移和侵袭作用的评估. A: MHCC97-H与不同的比率NK细胞共培养后用BrdU染色染. 增殖的MHCC97-H与BrdU抗体孵育后上流式细胞仪进行检测. BrdU阳性细胞被确定为增殖细胞; B: NK细胞对MHCC97-H的抑制率, 计算公式 = [(对照组繁殖细胞比率-实验组繁殖细胞比率)/对照组繁殖细胞比率]×100%; C: NK细胞组和对照组MHCC97-H细胞向无细胞区域迁移的情况(×100); D: NK细胞组和对照组MHCC97-H侵袭细胞数; E: 组织化学显示NK细胞组和对照组侵袭和迁移MHCC97-H 细胞数(结晶紫染色×200); F: NK细胞组和对照组MHCC97-H 迁移细胞数. 资料采用mean±SD表示(n = 3). ^aP<0.05, ^bP<0.01 vs 对照组. NK: 自然杀伤细胞.

图3 体内NK细胞抑制MHCC97-H增殖、转移作用的评估. A: 肝脏冰冻切片DAPI染色后荧光显微镜下用绿色(DAPI)和红色激发光(CFSE)激发后观察, Overlay是两者的重叠. ×200型; B: 第8周核磁共振检测裸鼠肝脏肿瘤大小; C: NK细胞组和对照组肿瘤体积大小; D: HE染色光学显微镜下裸鼠肺转移病灶(×200); E: NK细胞组和对照组裸鼠肺转移的数目及大小分级. 资料采用mean±SD表示(n = 5). ^aP<0.05 vs 对照组. NK: 自然杀伤细胞.

图4 IL-2对NK细胞的激活作用. A: NK细胞在有IL-2(IL-2组, 2 pg/mL)和无IL-2(对照组)条件下培养, NK细胞表面免疫分子表达采用流式细胞仪检测; B: IL-2组和对照组NK细胞表面免疫分子的表达情况. 资料采用mean±SD表示(n = 6). ^aP<0.05 vs 对照组. IL-2: 白介素-2; NK: 自然杀伤细胞.