白介素-1β siRNA联合骨髓间充质干细胞协同治疗急性肝衰竭

图1 MSC的鉴定和形态学观察. A: 大鼠MSC可见光和荧光图片; B: 流式细胞术检测MSC纯度. MSC: 骨髓间充质干细胞.

图2 IL-1β siRNA鉴定和筛选实验. A: IL-1β siRNA体外抑制LPS刺激的Raw264.7细胞分泌IL-1β; B: 注射腺病毒空载体后机体非特异免疫因子水平; C: 不同剂量IL-1β siRNA体外干扰效率; D: 不同时间点IL-1β siRNA体外干扰效率; ^aP<0.05. IFN-γ: 干扰素-γ; TNF-α: 肿瘤坏死因子-α; IL: 白介素.

图3 各组小鼠细胞移植后第3天血清中炎症因子水平. A: CXCL1; B: IL-1β; C: IL-10; D: IL-6. ^aP<0.05 vs ALF组, ^cP<0.05 vs ALF+MSC组. MSC: 骨髓间充质干细胞; IL: 白介素; ALF: 急性肝衰竭.

图4 转氨酶、生存曲线和HE病理. A: 各组小鼠细胞移植后1 wk ALT和AST水平; B: 各组小鼠生存曲线; C: 各组小鼠细胞移植后2 wk肝脏组织HE染色情况. ^aP<0.05 vs ALF组; ^cP<0.05 vs ALF+MSC组. MSC: 骨髓间充质干细胞; IL: 白介素; ALF: 急性肝衰竭; ALT: 谷丙转氨酶; AST: 谷草转氨酶.

图5 肝细胞增殖、凋亡和生长因子检测. A: Ki67免疫组织化学实验; B: 各组Ki67阳性细胞数. 数据为组织染色后随机5个视野的阳性细胞数的平均值(mean±SD); C: TUNEL免疫组织化学实验; D: 各组TUNEL阳性细胞数. 数据为组织染色后随机5个视野的阳性细胞数的平均值(mean±SD); E: 各组小鼠2 wk末时血清HGF水平; F:各组小鼠2 wk末时血清VEGF水平. ^aP<0.05 vs ALF+MSC组, ^cP<0.05 vs ALF+IL-1β siRNA组. MSC: 骨髓间充质干细胞; IL: 白介素; ALF: 急性肝衰竭; VEGF: 血管内皮生长因子; HGF: 肝细胞生长因子.

图6 IL-1β siRNA对MSC的保护作用. A: GFP阳性细胞荧光图片; B: GFP阳性细胞免疫组织化学图片; C: 各组GFP阳性细胞数. 数据为组织染色后随机5个视野的阳性细胞数的平均值(mean±SD). ^aP<0.05 vs MSC+IL-1β siRNA组. MSC: 骨髓间充质干细胞; IL: 白介素; GFP: 绿色荧光蛋白.