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图1 c-Met的表达及其下游通路的Western blot分析.
A: MHCC-97H和RBE细胞中c-Met磷酸化蛋白的表达; B: 使用PF-2341066后, 细胞内磷酸化蛋白的表达. p-Met: 磷酸化Met; ERK: 细胞外信号调节激酶; p-ERK: 磷酸化细胞外信号调节激酶; Akt: 蛋白激酶B; p-Akt: 磷酸化蛋白激酶B. aP<0.05 vs 对照组.
图2 c-Met的N-糖基化修饰.
A: Western blot结果; B: RBE中相对表达量; C: MHCC-97H的相对表达量. Nonglycosylated pro-Met: 非糖基化前Met; Nonglycosylated p145-Met: 非糖基化; N-Glycanase: N-聚糖酶; O-Glycanase: O-聚糖酶. aP<0.05 vs 对照组.
图3 c-Met的N-糖基化修饰来源于pro-Met的N-糖基化修饰.
A: 衣霉素抑制pro-Met的糖基化; B: 糖缺乏可抑制pro-Met的糖基化; C: 环乙酰亚胺可抑制非糖基化pro-Met的表达; D: MG132可抑制衣霉素诱导的p145Met的降解. GRP78: 葡萄糖调节蛋白; Nonglycosylated pro-Met: 非糖基化前Met; DMSO: 二甲亚砜; Tun: 衣霉素; CHX: 蛋白合成抑制剂放线菌酮; MG: 蛋白酶体抑制剂. aP<0.05 vs 对照组.
图4 抑制糖基化修饰诱导pro-Met的磷酸化.
A: 衣霉素启动了pro-Met的磷酸化; B: PF-2341066抑制了衣霉素诱导的pro-Met磷酸化; C: PF-2341066阻碍非糖基化pro-Met的活性及抑制Akt、ERK的磷酸化. Nonglycosylated pro-Met: 非糖基化前Met; pro-Met: Met前体; Tun: 衣霉素; PF: c-Met抑制剂PF-2341066; ERK: 细胞外信号调节激酶; p-ERK: 磷酸化细胞外信号调节激酶; Akt: 蛋白激酶B; p-Akt: 磷酸化蛋白激酶B. aP<0.05 vs 对照组.
图5 c-Met的膜定位需要其糖基化修饰.
A: c-Met在MHCC-97H细胞中的定位; B: 磷酸化c-Met在MHCC-97H细胞中的定位 注: DMSO: 二甲亚砜; Tun: 衣霉素; DAPI: 苯基吲哚染液; Merge: 荧光染料.
引文著录: 段春燕, 陈绍坤, 张春燕, 冯春红, 刘友平, 夏先明, 余文静, 代荣阳, 李洪. pro-Met的N-糖基化修饰对c-Met功能的影响. 世界华人消化杂志 2014; 22(20): 2826-2838