大鼠胰腺导管来源干细胞向胰岛素分泌细胞分化的体外培养

图1 原代PDSC的形态. A: 含血清组原代培养第3天(×200); B: 对照组PDSC呈单层贴壁生长(×100).

图2 诱导产物ICC的形态. A: 诱导培养第3天, 贴壁的PDSC开始相互聚集(×100); B: 诱导培养第10天, 立体的球状结构ICC形成(×200); C: 诱导培养第14天, 部分ICC脱壁呈悬浮生长, 周围可见很多小的圆形细胞(×40).

图3 PDSC表面分子表达特性的流式细胞仪鉴定. A: CD90; B: CD105; C: CD34; D: CD45.

图4 PDSC的免疫细胞化学鉴定. A: 培养前的细胞团内, 可见大量CK-19阳性细胞分布(×100); B: 第3代PDSC呈CK-19阴性(×100); C: 第3代PDSC呈PDX-1阳性, 胞质及胞核均着色(×100); D: 诱导分化培养2 wk, ICC内可见胰岛素阳性细胞分布(×40).

图5 培养前细胞团、PDSC、ICC的RT-PCR鉴定. 1: 培养前细胞; 2: 第5代PDSC; 3: 诱导分化培养2 wk的ICC.

图6 ICC(DTZ染色×100).

图7 分化培养前后细胞外液的胰岛素水平. ^bP<0.01 vs PDSC.