携带Pyk2基因的shRNA质粒构建及其在Lovo结肠癌细胞系中的表达

图1 Pyk2扩增后电泳图. 1-4: 4个样本的PCR产物; 5, 6: 两个阴性对照; 7: DNA Marker.

图2 转染4个位点质粒菌液及空载体PCR结果. 1: DNA Marker; 2-6分别为位点1、位点2、空载体、位点3、位点4的PCR产物.

图3 含四个位点Pyk2 shRNA片段的质粒1, 2, 3, 4测序结果. A-D分别为选择的4个位点, 经测序显示其核苷酸序列与其数据库中的原始序列一致.

图4 转染了3种siRNA质粒、无义基因、空载体及空白对照的绿色荧光照. A: Lovo细胞; B: 转染空载体的Lovo细胞; C: 仅转染无义基因的Lovo细胞; D: Pyk2 shRNA1; E: Pyk2 shRNA2; F: Pyk2 shRNA3.

图5 经质粒转染后Lovo细胞系中Pyk2 mRNA的表达. 1: 阳性对照; 2: Lovo细胞; 3: 转染空载体的Lovo细胞; 4: 仅转染无义基因的Lovo细胞; 5: Pyk2 shRNA1; 6: Pyk2 shRNA2; 7: Pyk2 shRNA3.

图6 Western blot检测Pyk2表达. 1: Lovo细胞; 2: 转染空载体的Lovo细胞; 3: 仅转染无义基因的Lovo细胞; 4: Pyk2 shRNA1; 5: Pyk2 shRN A2; 6: Pyk2 shRNA3.