痘苗病毒辅助的重组丙型肝炎病毒生产体系中生产细胞的选择

图1 人工构建的质粒PT7 HCV及PV HCV共转染BHK₂₁, HepG2, SMMC7721细胞株后, 培养上清中HCV RNA的PCR产物凝胶电泳图. M: DL2000; 1: BHK₂₁上清未用DNA酶处理; 2-3: BHK₂₁上清用DNA酶处理后; 4: 正常BHK₂₁上清; 5: HepG2上清未用DNA酶处理; 6-7: 转染后HepG2上清用DNA酶处理后; 8: 正常HepG2上清; 9: SMMC7721上清未用DNA酶处理; 10-11: 转染后SMMC7721上清用DNA酶处理; 12: 正常SMMC7721上清.

图2 HCV蛋白NS5及E2在BHK₂₁, HepG2, SMMC7721细胞中的表达. A: NS5; B: E2. M: 蛋白Marker; 1: 共转染pT7HCV 和pVHCV的BHK₂₁细胞; 2: BHK₂₁细胞; 3: 共转染pT7HCV 和pVHCV的HepG2细胞; 4: HepG2细胞; 5: 共转染pT7HCV 和pVHCV的SMMC7721细胞; 6: SMMC7721细胞.

图3 FQ-PCR方法测定各种细胞培养上清中HCV的拷贝数. A: 检测丙型肝炎病毒质粒标准品中丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸的荧光值Rn循环数变化曲线; B: 标准曲线.