巨噬细胞金属弹力酶对小鼠原位结肠癌生长及COX-2表达的影响

图1 真核表达载体pcDNA3. 1-MME的PCR鉴定和双酶切鉴定结果. 1: Lambda DNA/EcoRⅠ+HindⅢ digest marker; 2: BamHⅠ和XbaⅠ双酶切pGEM-T-MME的产物(大约分别为3.0 kb和830 bp); 3: BamHⅠ和XbaⅠ双酶切pcDNA3.1-MME的产物(大约分别为5.4 kb和830 bp); 4: pcDNA3.1-MME的PCR鉴定产物.

图2 各组CT-26细胞的免疫细胞化学染色(×200). A: pcDNA3.1-MME稳定转染细胞; B: 未转染组CT-26细胞.

图3 明胶酶谱电泳. 1: pcDNA3.1-MME稳定转染细胞; 2: pcDNA3.1空质粒转染细胞; 3: 未转染细胞. 每孔上样40 mg总蛋白.

图4 MME抑制小鼠结肠原位种植肿瘤的生长. A: MME转染组; B: pcDNA3.1空质粒转染组; C: 未转染组; 黑箭头指示为原发肿瘤灶, 黄箭头指示为肿瘤腹膜转移灶.

图5 三组原位结肠癌组织中MVD计数结果比较(SP法×200). A: MME转染组; B: 空质粒转染组; C: 未转染组.

图6 三组原位结肠癌组织中COX-2的免疫组化染色结果(SP×200). A: MME转染组; B: pcDNA3.1空质粒转染组; C: 未转染组.

图7 Western blot检测CT-26细胞裂解上清和原位结肠癌组织中COX-2的表达. A: CT-26细胞裂解上清中COX-2的表达; B: 原位结肠癌组织中COX-2的表达. 1: 空载体转染组; 2: 未转染组; 3: MME转染组. 每孔上样40 μg总蛋白..