应用载体介导的 RNAi 技术抑制人胃癌和腹膜间皮细胞中TGF-β1 的表达

图1 TGF-β₁特异性表达载体构建示意图.

图2 退火产物琼脂糖凝胶电泳图. M: 20 bp DNA Ladder Marker; 1: 编码发夹结构TGF-β1 siRNA的正义链. 上面一条带是sense和antisense形成的互补结构; 2: 编码发夹结构TGF-β1 siRNA的正、反义链退火产物; 3: 阴性对照组非特异性片段正、反义链退火产物. 3上面一条带为退火产物, 下面的为未结合成双链的正、反义链.

图3 TGF-β1的siRNA表达载体的DNA测序结果(A)和含非特异性片段的阴性对照表达载体的DNA测序结果(B).

图4 去掉内毒素的质粒琼脂糖凝胶电泳图. M: λ-HindⅢDNA Marker; 1: TGF-β1的siRNA表达载体; 2: 为阴性对照表达载体. 可见下面的超螺旋结构形式的浓度大, 上面有缺口的极少, 故构建的质粒纯度高.

图5 TGF-β1蛋白及mRNA的表达. A: 胃癌细胞SGC-7901 β-actin扩增产物; B: 腹膜间皮细胞β-actin扩增产物; C: 胃癌细胞SGC-7901 TGF-β1 mRNA扩增产物; D: 腹膜间皮细胞TGF-β1 mRNA扩增产物; E: 胃癌细胞SGC-7901 TGF-β1蛋白印记产物; F: 腹膜间皮细胞TGF-β1蛋白印记产物; 1为对照组, 2为TGF-β1-siRNA表达载体组, 3为非特异性片段siRNA表达载体组, 4为空白载体组.