基础研究
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世界华人消化杂志. 2023-04-28; 31(8): 307-315
Published online 2023-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v31.i8.307
长链非编码RNA PVT1诱导直肠癌细胞增殖、抑制凋亡并通过上调Atg5诱导其自噬
朱渊东, 刘海源, 雷鑫明, 彭雪强
朱渊东, 刘海源, 义乌市中心医院肛肠外科 浙江省金华市 322000
朱渊东, 副主任医师, 研究方向为结肠癌.
雷鑫明, 衢州市人民医院消化内科 浙江省衢州市 324000
彭雪强, 中国医科大学 辽宁省沈阳市 110000
基金项目: 义乌市科研计划项目, No. 20-3-165.
作者贡献分布: 此研究由朱渊东、刘海源、雷鑫明及彭雪强设计; 研究过程由朱渊东、刘海源、雷鑫明及彭雪强操作完成; 数据分析和写作由朱渊东、雷鑫明完成.
通讯作者: 雷鑫明, 主治医师, 324000, 浙江省衢州市智慧新城闽江大道100号, 衢州市人民医院消化内科. 1542620591@qq.com
收稿日期: 2022-11-24
修回日期: 2023-01-15
接受日期: 2023-04-23
在线出版日期: 2023-04-28
文章亮点
实验背景

lncRNA PVT1基因作为lncRNAs的一种, 已经被证实在多种肿瘤中发挥促癌作用, 但对于该基因在直肠癌中的生物学行为报道较少.

实验动机

本研究在结合国内外研究的基础上, 探讨lncRNA PVT1在直肠癌中表达以及与预后的关系, 以及对直肠癌自噬的调控机制和增殖凋亡的影响, 为直肠癌的靶向治疗提供可靠的靶点.

实验目标

探究lncRNA PVT1在直肠癌组织中的表达及对直肠癌细胞自噬和增值侵袭的影响.

实验方法

通过TCGA数据库获得92例直肠癌, 318例健康样本的lncRNA PVT1表达水平, 并且通过定量实时PCR检测直肠癌细胞SW837, HR8348, SW1463和FHC中lncRNA PVT1表达水平. 通过R语言包(survival, survminer)分析TCGA数据库分析lncRNA PVT1表达高低与直肠癌预后的关系. 过表达SW837, HR8348中的lncRNA PVT1. 利用transwell, CCK-8试剂盒、流式细胞实验分析其侵袭, 增值能力及凋亡的改变. 然后Western blot实验分析LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达, 免疫荧光实验分析LC3荧光斑点的改变, 透射电镜分析形态学判断自噬小体的改变. 之后共转染si-Atg5分析直肠癌细胞自噬水平的变化.

实验结果

LncRNA PVT1在直肠癌组织和细胞中表达都显著增加. 并且lncRNA PVT1的表达直肠癌预后相关, 过表达lncRNA PVT1后激活直肠癌自噬和诱导肿瘤细胞增殖, 侵袭并且抑制其凋亡(P<0.05).

实验结论

lncRNA PVT1在直肠癌组织和细胞中显著表达上调, 而且高表达的lncRNA PVT1与肿瘤细胞的细胞分裂周期和自噬显著相关. 细胞实验水平证实lncRNA PVT1促进直肠癌细胞增殖, 抑制其凋亡等恶性生物学行为. 同时也证实lncRNA PVT1诱导直肠癌细胞自噬通过上调Atg5, 这些表明lncRNA PVT1作为在直肠癌的发生发展中具有重要意义, 而且有望成直肠癌有效的治疗靶点.

展望前景

希望今后有更多对于直肠癌手术后标本、以及更多直肠癌细胞系进行分析.