原代肝细胞分离培养技术现状及展望

表2 各种肝细胞培养方法的优缺点对比

培养方法	最适对象	优点	缺点	参考文献
组织块贴壁培养法		操作简便, 流程短, 成本低	所培养的细胞数量有限、且细胞成分不纯; 细胞生长状态较差	[6]
肝细胞-非实质细胞混合培养法		细胞具有良好的生长状态和分化特性; 提高培养细胞的密度	需较高的细胞分离技术; 培养条件要求高	[26], [46]
单层胶原培养法		操作简单; 细胞能在较长时间内维持正常形态和生理功能, 有一定的增殖能力.	不能用于大规模细胞培养; 易使肝细胞失去分化表型	[47], [48], [49]
双层胶夹层培养法		细胞生长状态好; 良好微环境有助于维持肝细胞功能和分化特性	需要昂贵的胶原; 需要较高的技术支持	[50], [51]
微载体黏附培养法	动物细胞和人肝细胞系	具有相对较大培养空间; 培养环境均一, 避免发生接触抑制; 实现细胞可控生长; 细胞易于黏附, 生长状态好; 培养可自动化	细胞易失去正常形态和分化功能; 剪切力、营养供给等因素会影响细胞生存和分化; 存在使用安全性问题	[30], [31], [32], [33], [49], [52]
微囊培养法		培养的细胞具良好代谢活性; 能为细胞提供适宜的微环境; 细胞存活率高; 培养的细胞可用于异种移植	存在生物相容性问题; 细胞培养的效果受多种因素制约, 稳定性差	[34], [35], [53]
球形聚集体培养法	适用于原代细胞培养	设备简单, 节省经费; 培养的细胞具有良好的生长状态和分化特性; 不需特殊载体; 实现了高密度细胞培养	需纯度较高的细胞来源; 需较高操作水平	[36], [38], [54]
微流体通道培养法	适用于微量原代细胞培养	所需细胞数量和试剂量少; 能维持细胞良好的生长和分化状态; 细胞能维持特异性表型	需特殊技术、花费大; 细胞生长速率慢、易感性低; 不能进行大规模细胞培养	[39]
生物反应器培养系统	大规模细胞培养	可进行大规模细胞培养; 可避免异种细胞产物抑制细胞的生长、分化; 细胞生长状态好	需高的技术和经济支持; 细胞活力低; 肝细胞功能难以长期维持	[40], [41], [42], [44], [45], [55],