氧化苦参碱对人结肠癌细胞P21, P27, Cyclin E1及CDK2表达的影响

表1 RT-PCR引物序列及反应条件

基因	引物序列	PCR扩增片段(bp)	反应条件
β-actin	5'-GGA CTT CGA GCA AGA GAT GG-3'	404	94 ℃变性5 min; 94 ℃ 30 s, 60 ℃ 1 min,
	5'-ACA TCT GCT GGA AGG TGG AC-3'		72 ℃ 1min, 循环30次; 72 ℃延伸10 min
P21	5'-TTG ATT AGC AGC GGA ACA-3'	270	94 ℃变性5 min; 94 ℃ 60 s, 55 ℃ 1 min,
	5'-TAC AGT CTA GGT GGA GAA ACG-3'		72 ℃ 1 min, 循环28次; 72 ℃延伸5 min
P27	5'-CAA GTA CGA GTG GCA AGA-3'	492	94 ℃变性5 min; 94 ℃ 60 s, 54 ℃ 1 min,
	5'-TCC ATG AAG TCA GCG ATA-3'		72 ℃ 1 min, 循环29次; 72 ℃延伸5 min
Cyclin E1	5'-CTG GAT GTT GAC TGC CTT GA-3'	359	94 ℃变性5 min; 94 ℃ 30 s, 52 ℃ 1 min,
	5'-CCG CTG CTC TGC TTC TTA C-3'		72 ℃ 1 min, 循环30次; 72 ℃延伸5 min
CDK2	5'-CCT TGT TTG TCC CTT CTA C-3'	395	94 ℃变性3 min; 94 ℃ 30 s, 55 ℃ 1 min,
	5'-CAA ATC CAC CCA CTA TGA-3'		72 ℃ 1 min, 循环30次; 72 ℃延伸5 min